[发明专利]一种合成On-DNA 1,4-硫氮杂卓化合物的方法

权利要求书

1.一种合成On-DNA 1,4-硫氮杂卓化合物的方法，其特征在于：所述方法是以On-DNAα,β-不饱和羰基化合物和邻巯基胺类化合物为原料，在氰基硼氢化钠的存在下反应得到On-DNA产物；其中On-DNA α,β-不饱和羰基化合物的结构式为邻巯基胺类化合物的结构式为/

其中，结构式中DNA包含由人工修饰的和/或未修饰的核苷酸单体聚合得到的单链或双链的核苷酸链，该核苷酸链通过一个或多个化学键或基团与化合物中剩余部分相连；

R₁选自分子量1000以下与DNA和羰基碳原子直接相连的基团或者不存在；

R₂选自分子量1000以下与烯基碳原子直接相连的基团；

R₃选自分子量1000以下与DNA和烯基碳原子直接相连的基团或者不存在；

R₄选自分子量1000以下与羰基碳原子直接相连的基团；

R₅选自氢或分子量1000以下与烯基碳原子直接相连的基团；

或R₅分别与R₁、R₂、R₃或R₄成环；

R₆、R₆'选自氢或分子量1000以下的基团；或者R₆、R₆'相连形成分子量1000以下的环烷基、芳环；

所述方法包括以下步骤：将On-DNA α,β-不饱和羰基化合物溶解到pH＝5.5的磷酸缓冲液中，向摩尔当量为1，摩尔浓度为0.5-5mM的On-DNA α,β-不饱和羰基化合物溶液中，加入10～1000倍摩尔当量的邻巯基胺类化合物，再加入10-500倍摩尔当量的氰基硼氢化钠，在10℃～100℃下反应0.5～24小时。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的R₁、R₂、R₃、R₄分别选自烷基、取代烷基、羧基、5～10元芳基、取代5～10元芳基、5-10元芳杂环基、取代5-10元芳杂环基；其中，所述烷基为C₁～C₂₀烷基或C₃～C₈环烷基；取代烷基的取代基的数量为一个或多个；取代烷基的取代基是相互独立的选自卤素、羧基、硝基、烷氧基、卤代苯基、苯基、烷基苯基、杂环基中的一种或多种；取代5～10元芳基的取代基的数量为一个或多个，取代5～10元芳基的取代基是相互独立的选自卤素、氰基、硝基、羧基、烷氧基、C₁～C₂₀烷基、三氟甲基中的一种或多种；取代5-10元芳杂环基的取代基的数量为一个或多个，取代5-10元芳杂环基的取代基是相互独立的选自卤素、氰基、硝基、羧基、烷氧基、C₁～C₂₀烷基、三氟甲基中的一种或多种；

所述R₅选自氢、C₁～C₂₀烷基；所述R₆、R₆'选自C₁～C₂₀烷基；或者R₆、R₆'相连形成芳环。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述反应在溶剂中进行，溶剂为水、甲醇、乙醇、乙腈、二甲亚砜、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、无机盐缓冲液、有机酸缓冲液、有机碱缓冲液中任意一种或几种的含水混合溶剂。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述反应的加料顺序为先加入On-DNA α,β-不饱和羰基化合物，再加入邻巯基胺类化合物，30℃反应16小时后，再加入氰基硼氢化钠，60℃反应1小时。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述反应的反应温度为20℃、30℃、40℃、50℃、60℃、70℃或80℃。