[发明专利]一种镉离子微生物全细胞生物传感-吸附器的构建及应用

权利要求书

1.微生物，含有CadR基因、lpp-ompA-CdBD基因、荧光蛋白编码基因与驱动所述CadR基因、所述lpp-ompA-CdBD基因与所述荧光蛋白编码基因表达的启动子，所述启动子的活性由CadR蛋白质与镉的复合物激活；

所述CadR基因编码如下A1)、A2)或A3)的CadR蛋白质：

A1)氨基酸序列是序列表中序列2的蛋白质；

A2)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；

A3)在A1)或A2)的N末端或/和C末端连接蛋白质标签得到的融合蛋白质；

所述lpp-ompA-CdBD基因编码如下B1)、B2)或B3)的lpp-ompA-CdBD蛋白质：

B1)氨基酸序列是序列表中序列4的蛋白质；

B2)将序列表中序列4所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；

B3)在B1)或B2)的N末端或/和C末端连接蛋白质标签得到的融合蛋白质。

2.根据权利要求1所述的微生物，其特征在于：所述CadR基因为如下a1)或a2)或a3)：

a1)序列表中序列3所示的DNA分子；

a2)与a1)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且编码所述CadR蛋白质的DNA分子；

a3)在严格条件下与a1)或a2)限定的核苷酸序列杂交，且编码所述CadR蛋白质的DNA分子；

和/或，所述lpp-ompA-CdBD基因为如下b1)或b2)或b3)：

b1)序列表中序列1的第577-1266位所示的DNA分子；

b2)与b1)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且编码所述lpp-ompA-CdBD蛋白质的DNA分子；

b3)在严格条件下与b1)或b2)限定的核苷酸序列杂交，且编码所述lpp-ompA-CdBD蛋白质的DNA分子。

3.根据权利要求1或2所述的微生物，其特征在于：所述启动子为双向启动子；

进一步，所述启动子含有序列1的第506-534位。

4.微生物，含有由权利要求1-3中任一所述CadR基因、所述lpp-ompA-CdBD基因、所述荧光蛋白编码基因与所述启动子连接得到的DNA分子，所述启动子驱动所述CadR基因、所述lpp-ompA-CdBD基因、所述荧光蛋白编码基因的表达。

5.根据权利要求4所述的微生物，其特征在于：所述DNA分子还含有核糖体结合位点和/或终止子。

6.根据权利要求4或5所述的微生物，其特征在于：所述DNA分子为如下c1)或c2)或c3)：

c1)序列表中序列1所示的DNA分子；

c2)与c1)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且具有相同功能的DNA分子；

c3)在严格条件下与c1)或c2)限定的核苷酸序列杂交，且具有相同功能的DNA分子。

7.根据权利要求4-6中任一所述的微生物，其特征在于：所述DNA分子通过含有所述DNA分子的重组载体处于所述微生物中。

8.根据权利要求1-7中任一所述的微生物，其特征在于：所述微生物为细菌、酵母、藻或真菌。

9.下述任一产品：

X1、由权利要求1-3中任一所述CadR基因、所述lpp-ompA-CdBD基因、所述荧光蛋白编码基因与所述启动子组成的成套产品；

X2、权利要求4-6中任一所述的DNA分子；

X3、权利要求7所述的重组载体。

10.下述任一应用：

Y1、权利要求1-8所述的微生物在指示和/或富集镉中的应用；

Y2、权利要求1-8所述的微生物在制备指示和/或富集镉产品中的应用；

Y3、权利要求9所述产品在指示和/或富集镉中的应用；

Y4、权利要求9所述产品在制备指示和/或富集镉产品中的应用。