[发明专利]一种硫酸新霉素的发酵工艺

权利要求书

1.一种硫酸新霉素的发酵工艺，其特征在于，至少包括以下步骤：

（1）斜面培养基配制：斜面培养基灭菌后，趁热摇匀，铺成斜面，于28±0.5℃下培养1-5天，检查无菌后备用，得斜面培养基；

（2）斜面接种：将砂土孢子溶于无菌水，均匀涂布在斜面培养基上，于28±0.5℃下培养5-10天，并置于1-8℃下保存备用，得斜面孢子；

（3）孢子悬液制备：向斜面孢子中加入玻璃珠，振摇打下孢子；然后加入无菌水摇匀，密封置于1-8℃下保存备用，得孢子悬液；

（4）种子罐培养：将孢子悬液接种到种子罐中的种子培养基上，然后开启搅拌，并通入无菌空气，培养30-50h，得培养液；

（5）发酵罐培养：将培养液接入发酵罐中的发酵培养基上，开启搅拌，通入无菌空气，并定时检测，发酵培养200-260h后放罐，即得；

步骤（4）中，所述种子培养基的制备原料，按重量百分比计，为以下组分：葡萄糖1%、玉米浆1.0%、蛋白胨0.3%、玉米淀粉1%、花生饼粉0.5%、酵母膏3.0%、豆油1%、碳酸钙1.4%、硫酸铵0.1%、磷酸氢二钠0.1%，水补足余量；步骤（5）中，所述发酵培养基的制备原料，按重量百分比计，为以下组分：葡萄糖1-3%、玉米浆0.05-0.3%、蛋白胨0.5-2%、籼米粉6-8%、花生饼粉1.5-3.5%、黄豆饼粉0.1-1%、酵母膏0.5-2%、豆油0.05-0.2%、氯化钠0.4-0.5%、碳酸钙0.3-0.7%、硫酸铵0.3-0.8%、淀粉酶0.01-0.05%、磷酸二氢钾0.01-0.05%、磷酸二氢钠0.01-0.1%、水补足余量。

2.根据权利要求1所述的硫酸新霉素的发酵工艺，其特征在于，步骤（1）中，所述斜面培养基的制备原料，按重量百分比计，至少包括以下组分：葡萄糖0.5-2%、牛肉膏0.01-0.5%、蛋白胨0.1-0.5%、玉米浆0.01-0.3%、氯化钠0.1-1%、琼脂1-5%、水补足余量。

3.根据权利要求1所述的硫酸新霉素的发酵工艺，其特征在于，所述种子培养基的制备方法，包括以下步骤：

（1）向种子罐中加至少一半的水，然后加入葡萄糖、玉米浆、蛋白胨、玉米淀粉、花生饼粉、酵母膏、硫酸铵、磷酸氢二钠，搅拌均匀，并用碱调节pH值为7-8；

（2）加入碳酸钙，用剩余的水冲洗罐壁；然后加入豆油，关闭罐盖；

（3）将种子罐加热至115-130℃，控制罐内压力为0.1-0.15MPa，保温20-50min，进行灭菌；

（4）灭菌结束后，向罐内通入无菌空气，并将种子罐冷却至30-40℃，即得。

4.根据权利要求1所述的硫酸新霉素的发酵工艺，其特征在于，所述发酵培养基的制备原料，按重量百分比计，为以下组分：葡萄糖1%、玉米浆3%、蛋白胨0.5%、籼米粉7%、花生饼粉2.8%、黄豆饼粉0.8%、酵母膏1%、豆油0.2%、氯化钠0.45%、碳酸钙0.5%、硫酸铵0.4%、淀粉酶0.03%、磷酸二氢钾0.03%、磷酸二氢钠0.05%、水补足余量。

5.根据权利要求1所述的硫酸新霉素的发酵工艺，其特征在于，所述发酵培养基的制备方法，包括以下步骤：

（1）向发酵罐中加入至少1/4的水，然后加入籼米粉和淀粉酶，加热至55-70℃，搅拌10-40min；

（2）向发酵罐中加入黄豆饼粉、花生饼粉、玉米浆、酵母膏、葡萄糖、蛋白胨、硫酸铵、氯化钠、碳酸钙、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠，并加入剩余的水，搅拌均匀；然后加入豆油，关闭罐盖；

（3）将发酵罐加热至115-130℃，控制罐内压力为0.1-0.15MPa，保温20-50min，进行灭菌；

（4）灭菌结束后，向罐内通入无菌空气，并将发酵罐冷却至30-40℃，即得。

6.根据权利要求1所述的硫酸新霉素的发酵工艺，其特征在于，步骤（5）中，所述发酵培养过程中，还原糖的重量比维持在0.5-3%之间，氨氮含量控制在4-25mg/mL之间。