[发明专利]一种抗人EGFR的纳米抗体和应用

说明书

本发明公开了一种抗人EGFR的纳米抗体和应用。该纳米抗体是氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示的aEG4D9纳米抗体；或是氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示的aEG4D9纳米抗体与氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的aEG1B4纳米抗体、氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的aEG2C7纳米抗体和氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示的aEG6B2纳米抗体中的至少一种组合形成的抗体。该纳米抗体具有高度亲和力、特异性和低免疫原性，并且具有较好的稳定性，结构简单，易于进行工程化改造等优点，可更好地应用于抗体药物的开发。

本申请是申请号为“201811129703.9”、发明名称为“抗人EGFR的纳米抗体及其应用”的中国发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种抗人EGFR的纳米抗体和应用。

背景技术

癌症这一名词在公元前400多年就被提出，经过2000多年依然没有被攻克，如今对人类健康的威胁愈加明显。近年来，研究发现表皮生长因子(EGFR)在多种实体瘤细胞中过表达，并且在癌症的发生、发展过程中发挥重要的作用，与预后差和耐药性正相关。EGFR在癌细胞中过表达可导致EGFR/EGF信号通路的持续性激活，促进癌细胞的增殖、迁移及侵袭活动，并且还可以促进VEGF因子的分泌，导致癌组织微环境血管形成。目前，靶向EGFR的抗体在非小细胞肺癌的临床治疗取得了较好的效果，但由于是嵌合型抗体，所以存在一定的免疫源性，并且由于其分子量大渗透能力差，不能有效清除微小病灶。

纳米抗体(Nanobody，Nb)是一种只含有单个结构域的基因工程抗体，能够以高亲和力和特异性与抗原结合。纳米抗体由于抗体分子量小，便于在大肠杆菌中表达，大大降低了抗体生产的成本。同时，抗体结构简单，利于对其进一步改造。纳米抗体分子体积较小的特点也提高了抗体在疗中过程中的组织渗透能力。因此，抗EGFR纳米抗体在EGFR靶向的癌症治疗中，具有很高的医学应用价值。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种人EGFR的纳米抗体。

本发明的另一目的在于提供上述抗人EGFR的纳米抗体的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种抗人EGFR的纳米抗体，为名称为aEG4D9纳米抗体；或是名称为aEG4D9纳米抗体与名称为aEG1B4纳米抗体、aEG2C7纳米抗体、aEG2E12纳米抗体和aEG6B2纳米抗体中的至少一种组合形成的抗体；

所述的aEG1B4纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；

所述的aEG2C7纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；

所述的aEG2E12纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示；

所述的aEG4D9纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示；

所述的aEG6B2纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。

编码上述抗人EGFR的纳米抗体的核苷酸序列，是编码所述的aEG4D9纳米抗体的核苷酸序列；或是编码所述的aEG4D9纳米抗体的核苷酸序列与编码所述的aEG1B4纳米抗体的核苷酸序列、编码所述的aEG2C7纳米抗体的核苷酸序列、编码所述的aEG2E12纳米抗体的核苷酸序列和编码所述的aEG6B2纳米抗体的核苷酸序列中的至少一种组合形成的核苷酸序列。

编码所述的aEG1B4纳米抗体的核苷酸序列优选如SEQ ID NO:8所示。

编码所述的aEG2C7纳米抗体的核苷酸序列优选如SEQ ID NO:9所示。

编码所述的aEG2E12纳米抗体的核苷酸序列优选如SEQ ID NO:10所示。