[发明专利]一种大枣药材中环磷腺苷含量的测定方法及其应用

说明书

本发明公开了一种大枣药材中环磷腺苷含量的测定方法及其应用，属于中药分析、质量鉴别及控制技术领域。基于高效液相色谱仪，检测大枣药材中环磷腺苷的含量，对大枣药材成分进行定量分析，实现对大枣药材的质量控制；本方法操作简单、分析速度快、准确且重复性好，为大枣药材中环磷腺苷等成分分析提供了科学可靠的分析方法，为完善大枣药材的质量标准奠定了基础。

技术领域

本发明涉及一种中药中有效成分的测定方法及其应用，尤其涉及一种大枣药材中环磷腺苷含量的测定方法及其应用，属于中药分析、质量鉴别及控制技术领域。

背景技术

大枣药材为鼠李科植物枣Ziziphus jujuba Mill.的干燥成熟果实，为秋季果实成熟时采收、晒干。其可补中益气，养血安神。用于脾虚食少，乏力便溏，妇人脏躁。其中，大枣药材中有效成分环磷腺苷是为参与调节细胞功能的第二信使物质，其作用非常广泛，能使心肌收缩力增强，舒张平滑肌、扩张冠状动脉血管、改善肝功能、促进神经再生，促进呼吸链氧化酶的活性及改善心肌缺氧等。

目前，极少有对大枣药材中含量指标成分(特别是环磷腺苷)进行研究，比如：中国药典(2015年版)中也未规定大枣药材的含量指标成分。于2015年12月23日公开了一种公开号为CN105181862A，名称为“大枣及其提取物与制剂的质量控制方法及应用”的专利文献，其中，具体公开：通过高效液相色谱串联蒸发光散射检测器的分离分析技术，借助一测多评方法，通过计算校正因子，实现对大枣中的6个三萜类化学成分含量进行计算。其以白桦脂酸、齐墩果酸、乌苏酸、桦木酮酸、齐墩果酮酸、乌苏酮酸为对照品，采用反相Cl8色谱柱。在该专利文献中，其对照品多样，不易控制；供试品制备需要经过提取，减压蒸干，加甲醇再溶解，操作较为复杂；其检测条件需要串联蒸发光散射检测器，并需要推荐色谱柱，对设备要求较高；并且，在该专利文献中，未进行准确度、稳定性、重复性等方法学研究。

发明内容

本发明旨在解决现有技术问题，而提出了一种大枣药材中环磷腺苷含量的测定方法及其应用。在本技术方案中，基于普通的高效液相色谱仪，检测大枣药材中环磷腺苷的含量，对大枣药材成分进行定量分析，实现对大枣药材的质量控制；本方法操作简单、分析速度快、准确且重复性好，为大枣药材中环磷腺苷等成分分析提供了科学可靠的分析方法，为完善大枣药材的质量标准奠定了基础。

为了实现上述技术目的，提出如下的技术方案：

一种大枣药材中环磷腺苷含量的测定方法，包括如下步骤：

A.色谱条件与系统适用性试验

色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱长为250mm，内径为4.6mm，粒度为5μm；

色谱柱柱温：30℃；

流动相：甲醇-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液，其中，甲醇与磷酸二氢钾溶液的体积比为10：90；

流动相流速：1.0mL/min；

进样量：10μL；

波长：259nm；

理论板数按环磷腺苷峰计算应不低于3000；

B.对照品溶液的制备

取环磷腺苷对照品，精密称定，加甲醇，制成每1mL含10μg的溶液，即得；

C.供试品溶液的制备

取本品粉末，过三号筛，称定1.0g，加入甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理(功率600W，频率40kHz)20min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

D.测定

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得。