[发明专利]一种SUMO化修饰捕获探针的合成方法及应用

权利要求书

1.一种SUMO化修饰捕获探针，其特征在于，所述的SUMO化修饰捕获探针分子式为SUMO-C₆H₈NO₃，结构式如下式(I)所示：

所述的SUMO为人源SUMO-1，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，其氨基酸序列如SEQ IDNO：2所示。

2.一种如权利要求1所述的SUMO化修饰捕获探针的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括以下步骤：

步骤1、通过基因克隆，得到人源SUMO的全长cDNA序列；

步骤2、将步骤1)得到的含有SUMO全长cDNA序列质粒，通过在大肠杆菌中重组表达SUMO蛋白多肽，并通过亲和纯化，得到纯品SUMO蛋白多肽；

步骤3、将步骤2)得到的纯品SUMO蛋白多肽，通过全化学合成方法，得到SUMO-C₆H₈NO₃荧光探针。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤3)中进一步包括：

3.1)将纯品SUMO蛋白多肽，氯甲酸乙酯及N-甲基吗啉于四氢呋喃，降温冷却至-20℃搅拌反应；

3.2)在步骤3.1)反应后，升温到-5℃，孵育后，在此温度下滴加叠氮化钠水溶液，室温反应；

3.3)将步骤3.2)所得产物以醋酸乙酯提取后，加无水硫酸镁干燥，减压浓缩回收得到的白色固体；

3.4)将步骤3.3)所的白色固体，溶于甲苯中，加热至100℃；

3.5)待步骤3.4)的反应液中有气泡放出时，加入烯丙氧羰基，于100℃搅拌反应；

3.6)步骤3.5)中反应结束后，降温到65℃以下即析出产品结晶，抽滤得到粗品，以甲醇为溶剂重结晶，得到晶体；

3.7)将步骤3.6)中所得晶体溶于干燥的三氯甲烷中；

3.8)待步骤3.7)中充分溶解后，冰浴下加入mCPBA，立即置换氮气，冰浴搅拌反应；

3.9)TLC监控至反应完毕，加水淬灭反应，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗；

3.10)将步骤3.9)中有机相由无水硫酸钠干燥后，减压旋干溶剂，硅胶柱层析分离纯化，得到白色粉末；溶解后，经胰蛋白酶切后，LC-MS鉴定。

4.如权利要求1所述的SUMO化修饰捕获探针或者如权利要求2或3所述的方法制备获得的SUMO化修饰捕获探针在制备用于癌症诊断和/或预后的试剂中的用途。