[发明专利]17-O-乙酰-17-β雌二醇的自组装的三聚体、其制备、活性和应用

说明书

本发明公开了下式的17‑O‑乙酰‑17‑β雌二醇的自组装三聚体[17‑O‑乙酰‑17‑β雌二醇]₃,公开了[17‑O‑乙酰‑17‑β雌二醇]₃的制备方法及表征方法,进一步公开了[17‑O‑乙酰‑17‑β雌二醇]₃对卵巢切除雌性小鼠的治疗作用。因而本发明公开了[17‑O‑乙酰‑17‑β雌二醇]₃在制备治疗女性绝经反应药物中的应用。

技术领域

本发明涉及一种17-O-乙酰-17-β雌二醇的自组装的三聚体[17-O-乙酰-17-β雌二醇]₃,涉及[17-O-乙酰-17-β雌二醇]₃的制备方法及表征,进一步涉及[17-O-乙酰-17-β雌二醇]₃对卵巢切除雌性小鼠的治疗作用。因而本发明阐明了[17-O-乙酰-17-β雌二醇]₃在制备治疗女性绝经反应药物中的应用。本发明属于生物医药领域。

背景技术

在过去的几十年里,普遍认为绝经前的健康女性的卵巢会分泌一种雌激素。这种雌激素被称为17-β雌二醇(Lieveritz,R.W.,Amer.J.of Obstetrics and Gynecology,Vol.156,pp. 1289-1293,1987)。疾病,卵巢切除术,外伤性损害的衰老可导致17-β雌二醇缺乏。随着衰老逐步进展,女性的卵巢排卵变得既不太频繁和也大不可预测。相应地,卵巢分泌17-β雌二醇的量逐渐减少。女性卵巢逐渐丧失功能自然地发生在45-55岁的年龄,导致月经周期最终停止,也就是绝经。

在过去的几十年里还认为,处在正常排卵周期中的卵巢分泌17-β雌二醇的产量范围为 60-600μg/天,导致血液循环中17-β雌二醇浓度范围为40-400pg/mL。绝经前的女性的血液循环中17-β雌二醇浓度随月经周期变化。女性进入绝经期后,逐步发生不可逆的卵巢衰竭, 卵巢分泌17-β雌二醇的产量范围逐步从60-600μg/天降到不足20μg/天,血液循环中17-β雌二醇的浓度逐步从40-400pg/mL大幅度降到不足30pg/mL(Stumpf,P.G.,Obstetricsand Gynaecology,Vol.75(suppl.)pp.95-135,1990)。如此低水平的17-β雌二醇可导致典型的绝经后症状,例如潮热,泌尿生殖器萎缩和矿物质丟失性骨质疏松(Marsh,M.S.et.al., British Medical Bulletin,Vol.48,pp.426-457,1992)。

在过去的几十年里进一步认为,最具有活性的天然存在的人类雌激素是非结合的17-β雌二醇并提出雌激素替代治疗(HRT)。HRT的宗旨是,通过补充17-β雌二醇使绝经女性血液循环中17-β雌二醇浓度尽可能恢复到绝经前的生理水平,以便对抗绝经后症状。

在补充17-β雌二醇的HRT的几十年里,发现这种HRT并没有产生预期效果。虽然这种HRT可对抗绝经后的骨质疏松症,但不能改善绝经后的潮热的泌尿生殖器萎缩。更加意外的是,这种HRT还有致癌和引起血栓等副作用。

在化学修饰17-β雌二醇的长期研究中,发明人不得不反复思考,到底是什么原因使得补充17-β雌二醇出了问题。按照临床医学事实,绝经前的女性几乎没有致癌风险,血栓风险及出现潮热的泌尿生殖器萎缩风险。而补充17-β雌二醇的绝经女性却有这些风险。思考使发明人逐步认识到这里存在明显的逻辑性矛盾。这种逻辑性矛盾让发明人怀疑,卵巢分泌的雌激素或许不是17-β雌二醇。于是,发明人摘取雌性小鼠的卵巢并匀浆化。卵巢匀浆与光谱纯甲醇混合,反复超声震荡。卵巢匀浆的甲醇萃取液用氮吹干,再用光谱纯甲醇萃取。萃取液接受HPLC-FT-ICR-MS检测。令人惊讶的是,在雌性小鼠卵巢匀浆的甲醇萃取液的HPLC-FT-ICR-MS谱中未找到17-β雌二醇的峰,而找到了17-O-乙酰-17-β雌二醇的峰。于是,发明人又制备并萃取了雌性小鼠的器官和血液的匀浆。萃取液接受HPLC-FT-ICR-MS检测。同样,在雌性小鼠的器官和血液的匀浆的甲醇萃取液的HPLC-FT-ICR-MS谱中未找到17-β雌二醇的峰,而找到了17-O-乙酰-17-β雌二醇的峰。根据这个发现,发明人提出了本发明。