[发明专利]用于东方鲀属鱼类快速鉴定的引物对、试剂盒和方法有效
申请号: | 202011385690.9 | 申请日: | 2020-12-01 |
公开(公告)号: | CN113151484B | 公开(公告)日: | 2022-05-20 |
发明(设计)人: | 石俊霞;姜帆;朱水芳 | 申请(专利权)人: | 中国检验检疫科学研究院 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 北京百欧知识产权代理事务所(普通合伙) 11930 | 代理人: | 吴泳历 |
地址: | 100176 北京市大*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 东方 鱼类 快速 鉴定 引物 试剂盒 方法 | ||
本发明一种用于东方鲀属鱼类快速鉴定的引物对、试剂盒和方法,属于食品物种来源鉴定技术,具体所述引物对为Tak_F/Tak_R‑1或者Tak_F/Tak_R‑2,还公开了一种用于东方鲀属鱼类快速鉴定的方法;该方法具有广泛适用性的东方鲀属河鲀鱼多目标快速鉴定技术体系,能够快速准确地成功地将与东方鲀肉质产品容易混淆的皖鱼、腹刺鲀、兔头鲀等易混淆鱼类物种区分开来,检测特异性强,灵敏度能达到0.1ng/ul。
技术领域
本发明涉及食品物种来源鉴定技术,具体涉及一种用于东方鲀属鱼类快速鉴定的引物对、试剂盒和方法。
背景技术
随着我国经济水平的发展,我国人民对于营养与健康的要求日益增长,河鲀鱼因其味道鲜美,食材稀有,肉质细嫩。且与一般鱼类相比,河鲀肉具有低脂肪、高蛋白的特性,同时还富含钠、钾、磷、镁、钙、铁、锌、铜等矿物元素和甲硫氨酸、赖氨酸、色氨酸、缬氨酸等人体必需氨基酸。深受寻求新鲜感市民的追捧,其经济链也逐步形成。河鲀泛指鲀形目中 4科7属57种的河鲀,其中东方鲀属(Takifugu)22种,占比例最大。东方鲀鱼属隶属于鲀形目Letrodontiforms、鲀科Tetraodontidae、东方鲀属Takifugu,俗称河鲀、气泡鱼,属于洄游性鱼类,分布于东海、黄海、渤海以及长江中下游,是一种经济价值极高的水产品。我国沿海地区较为常见的东方鲀河鲀有黄鳍东方鲀(Takifugu xanthopterus)、暗纹东方鲀(Takifugu fasciatus)、菊黄东方鲀(Takifugu flavidus)和红鳍东方鲀(Takifugurubripes)等。
我国目前开放养殖,可流通市场食用的仅有红鳍东方鲀和暗纹东方鲀。
河鲀全身含毒,肝、鱼子和血液的毒性尤为强烈。因而河鲀鱼食用是否安全极其考验养殖场地和厨师厨艺技巧。不少人因为馋于肝的鲜美,食用后中毒。不仅直接食用河鲀会造成中毒,河鲀毒素还能够随着食物链在处于食物链较顶端的物种中富集,最后威胁人类健康。同时,河鲀还是一种观赏鱼类,一般称为狗头鱼或娃娃鱼。目前我国对某些有毒生物危害还没有形成成熟的检测鉴定技术、方法、试剂和标准,无法及时诊断出中毒原因、甚至出现误诊。
食品安全关系国计民生,食品物种鉴定是食品安全链的重要环节。原料来源不明或成分组成不明的食物会对食品安全带来巨大的风险与隐患。同时真假河鲀鱼肉掺杂,河鲀鱼的非法捕捞、养殖、贩卖,破坏了市场经济的正常运转。因此准确、快速的鉴定食品中的河鲀成分十分重要。
近十年来,多种分子生物学技术已应用于鱼类的快速鉴定,例如:DNA条形码技术(DNA Barcoding)、PCR技术、限制性片段长度多态性技术(Restriction Fragment LengthPolymorphism,RFLP)、随机扩增多态性DNA技术(Random Amplified Polymorphic DNA,RAPD)、扩增片段长度多态性技术(Amplified Fragment Length Polymorphism,AFLP)以及基因芯片技术等,但从目前已有报道来看,现有报道只针对鲀科鱼类个别物种建立了快速检测方法,未能完全满足我国市场监管、食品安全监管的检测检验需求。
发明内容
本发明的目的是针对上述问题,提供一种特异性强、灵敏度高的用于东方鲀属鱼类快速鉴定的引物对,采用的技术方案是:
一种用于东方鲀属鱼类快速鉴定的引物对,所述引物对为Tak_F/Tak_R-1或者Tak_F/Tak_R-2,引物序列为:
Tak_F:5’-TGAGCCGGAATAGTAGGCAC-3’,
Tak_R-1:5’-GGTGTTTGGTATTGTGAGATTGC-3’,
Tak_R-2:5’-GGTGYTTYGGTATTGTGAGATTGC-3’,Y=C,T。
本发明的另一目的是提供一种用于东方鲀属鱼类快速鉴定的试剂盒,包含上述的引物对,和PCR反应试剂。
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