[发明专利]一种新型冠状病毒COVID-19核酸检测引物组、探针组及检测试剂盒和检测方法在审
申请号: | 202011388376.6 | 申请日: | 2020-12-02 |
公开(公告)号: | CN112695134A | 公开(公告)日: | 2021-04-23 |
发明(设计)人: | 魏云海;董海燕;杨海兵;邵婕;金玫华;徐德顺;纪蕾 | 申请(专利权)人: | 湖州市中心医院;湖州市疾病预防控制中心 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11 |
代理公司: | 浙江千克知识产权代理有限公司 33246 | 代理人: | 裴金华 |
地址: | 313000 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 新型 冠状病毒 covid 19 核酸 检测 引物 探针 试剂盒 方法 | ||
1.一种新型冠状病毒COVID-19的检测引物组,其特征在于,包括核苷酸序列如下的两对特异性引物对:
针对病毒ORF1ab基因片段的特异性引物对:
ORF1ab-F:如SEQ ID NO: 1所示,
ORF1ab-R:如SEQ ID NO: 2所示;
针对病毒N基因片段的特异性引物对:
N-F:如SEQ ID NO: 3所示,
N-R:如SEQ ID NO: 4所示。
2.一种新型冠状病毒COVID-19的探针组,其特征在于,所述探针组包括核苷酸序列如下的两条探针:
针对病毒ORF1ab基因片段的探针:
ORF1ab-P:如SEQ ID NO: 5所示;
针对病毒N基因片段的探针:
N-P:如SEQ ID NO: 6所示。
3.根据权利要求2所述的探针组,其特征在于,所述探针的5′端标记有荧光报告基团,3′端标记有荧光淬灭基团。
4.根据权利要求3所述的探针组,其特征在于,ORF1ab-P基因片段的探针的5′端标记有荧光报告基团FAM,3′端标记有荧光淬灭基团BHQ1;N-P基因片段的探针的5′端标记有荧光报告基团HEX,3′端标记有荧光淬灭基团BHQ1。
5.一种新型冠状病毒COVID-19的检测试剂盒,其特征在于,包括检测引物组和探针组,所述检测引物组为权利要求1所述的新型冠状病毒的检测引物组,所述探针组为权利要求2或权利要求3或权利要求4所述的探针组。
6.根据权利要求5所述的检测试剂盒,其特征在于,还包括内标引物对和内标探针;
其中,内标引物对的核苷酸序列如下:
RNP-F:如SEQ ID NO: 7所示,
RNP-R:如SEQ ID NO: 8所示;
内标探针的核苷酸序列如下:
RNP-P:如SEQ ID NO: 9所示。
7.根据权利要求6所述的检测试剂盒,其特征在于,RNP-P的5′端标记有荧光报告基团,3′端标记有荧光淬灭基团。
8.根据权利要求7所述的检测试剂盒,其特征在于,RNP-P的5′端标记有荧光报告基团TEXAS RED,3′端标记有荧光淬灭基团BHQ2。
9.根据权利要求5所述的检测试剂盒,其特征在于,还包括RT-PCR酶混合液和RT-PCR缓冲液。
10.根据权利要求5所述的检测试剂盒,其特征在于,还包括阳性对照品和阴性对照品。
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