[发明专利]一种挑取模式动物秀丽隐杆线虫工具的制备及其使用方法

权利要求书

1.一种挑取模式动物秀丽隐杆线虫工具的制备，其特征在于，包括以下步骤：

S1、选用长度约12-15厘米的手柄；

S2、所述步骤S1中的手柄由两部分组成，其由粗细均匀的杆子与套在其端部的微量移液器塑料枪头构成，所述微量移液器塑料枪头选用200微升的黄色枪头；

S3、调试好显微镜，在显微镜下，塑料枪头尖端热容化后接头发丝或睫毛，冷却后连接，安置好头发丝或睫毛，明火烘烤塑料枪头融化成团，在融化成团没有凝固前在显微镜下与头发丝或睫毛端点连接，将1到2毫米头发丝或睫毛包埋在粘性热融塑料团里连接牢固，调整好头发丝或睫毛与杆子之间的角度，冷却后连接完成，切断头发丝或睫毛留2到3毫米头发丝或睫毛；

S4、头发丝或睫毛所在直线与手柄的轴线之间夹角为120度-130度，即完成挑取模式动物秀丽隐杆线虫工具的制备。

2.一种基于权利要求1所述的挑取模式动物秀丽隐杆线虫工具的使用方法，其特征在于，所述使用方法包括以下内容：

线虫成虫挑取步骤：

(1)、超净间进行操作，准备新鲜制作带有NGM线虫培养基的培养皿，线虫食物OP50大肠杆菌新鲜、充足，保持环境温度为21度，准备新鲜的200毫克/升二氧化氯溶液；

(2)、使用线虫挑取工具前，将其头发丝端在新鲜200毫克/升二氧化氯溶液浸泡2分钟，灭菌，挑取工具浸泡灭菌完成后，需使用无菌纸拭干；

(3)、挑取线虫时，每换一种线虫前，挑取工具需要灭菌，准备挑取线虫时，手捏挑取工具的柄，将培养有线虫的培养皿放置在体式显微镜下，调试好体式显微镜的亮度、焦距及放大倍数；在放大倍数为400倍的显微镜下倾斜挑取线虫；

(4)、手捏挑取工具手柄，保持倾斜，毛发所在直线与培养基平面夹角应较小；

(5)、在线虫成虫中段位置，把短毛发尖插进线虫身体下，将其挑起，并转移至新的培养基上；

(6)、将挑有虫子的头发在新培养基上划几次，使线虫从头发上脱落实现转移；

(7)、转移到新培养基的过程也应该在显微镜下操作，以确保线虫成功转移；

(8)、重复操作直至挑取任务要求量的虫子；

(9)、结束后，挑取工具头发丝端在新鲜200毫克/升二氧化氯溶液浸泡灭菌2分钟后放回原位；

线虫幼虫的挑取步骤：

(1)、使用睫毛进行挑取，睫毛与虫体主体所在直线呈30-45度夹角进行挑取线虫幼虫；

(2)、在显微镜下确认转移到新平板上；

(3)、一次转移多条线虫幼虫时，采用上述挑成虫的线虫工具在有较多幼虫的NGM平板上“扫”几下，把虫子“刮”下来，借助培养基上大肠杆菌较为粘稠的作用力黏附多条幼虫，再转移到新培养皿中。