[发明专利]一种知柏地黄丸指纹图谱的检测方法及其应用

权利要求书

1.一种知柏地黄丸指纹图谱的检测方法，包括以下步骤：

1)供试品溶液的制备：将知柏地黄丸样品加入有机溶剂溶解，超声提取后冷却，过滤，取续滤液即得供试品溶液；

2)对照品溶液的制备：将莫诺苷、马钱苷、芒果苷、盐酸小檗碱和丹皮酚对照品，加入有机溶剂超声溶解，配成对照品溶液；

3)测定：采用相同色谱条件的高效液相色谱法分别测定供试品溶液和对照品溶液，获得供试品溶液的指纹图谱和对照品溶液的指纹图谱，将供试品溶液的指纹图谱与对照品溶液的指纹图谱进行比较，对供试品溶液指纹图谱中的指标成分进行归属定位，从而获得知柏地黄丸指纹图谱。

2.根据权利要求1所述的一种知柏地黄丸指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤1)或2)中，包括以下条件中任一项或多项：

A1)步骤1)中，所述知柏地黄丸样品在制备供试品溶液前要进行⁶⁰Co-γ射线辐照，所述⁶⁰Co-γ射线辐照的剂量为3-10KGy；

A2)步骤1)中，所述知柏地黄丸样品加入的重量与所述有机溶剂加入的体积之比为1：15-25，g/mL；

A3)步骤1)中，所述超声提取时间为15-60min；

A4)步骤1)中，所述超声提取的功率为80-120W，所述超声提取的频率为30-50kHz；

A5)步骤2)中，所述超声溶解中，所述超声提取时间为5-15min；

A6)步骤2)中，所述超声溶解中，所述超声提取的功率为50-100W，所述超声提取的频率为10-40kHz；

A7)步骤1)或2)中，所述有机溶剂为50-100％甲醇。

3.根据权利要求1所述的一种知柏地黄丸指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤3)中，所述高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱为C18色谱柱；检测器为光电二极管阵列检测器；柱温为25-35℃；进样量为1-20μL；流速为0.8-1.2mL/min；检测波长为200-400nm；流动相为乙腈-0.05-0.2％磷酸水溶液，其中，A相为乙腈，B相为0.05-0.2％磷酸水溶液；分析时间为100min；梯度洗脱。

4.根据权利要求3所述的一种知柏地黄丸指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱的具体程序为：0-5min，A相：B相体积比为5：95-7：93；5-20min，A相：B相体积比为7：93-11：89；20-35min，A相：B相体积比为11：89-11：89；35-60min，A相：B相体积比为11：89-25：75；60-80min，A相：B相体积比为25：75-50：50；80-95min，A相：B相体积比为50：50-80：20；95-100min，A相：B相体积比为80：20-95：5。

5.根据权利要求1-4任一所述的一种知柏地黄丸指纹图谱的检测方法在知柏地黄丸中成分的质量检测中的用途。

6.一种知柏地黄丸的质量检测方法，包括采用权利要求1-4任一所述的知柏地黄丸指纹图谱的检测方法获得知柏地黄丸指纹图谱，将得到的知柏地黄丸指纹图谱与相同指纹图谱检测条件下获得的知柏地黄丸的标准指纹图谱进行相似度比较。

7.根据权利要求6所述的一种知柏地黄丸的质量检测方法，其特征在于，采用与权利要求1-4任一所述的知柏地黄丸指纹图谱的检测方法相同的条件得到知柏地黄丸的标准指纹图谱，所述知柏地黄丸的标准指纹图谱包括12个共有指纹峰，以11号峰为参照峰S峰，保留时间为0.9990-1.0010，其他11个共有指纹峰的相对保留时间依次为1号峰0.0462-0.0482、2号峰0.0612-0.0632、3号峰0.2956-0.2986、4号峰0.3329-0.3369、5号峰0.4760-0.4820、6号峰0.5210-0.5280、7号峰0.6233-0.6293、8号峰0.7946-0.7996、9号峰0.8442-0.8492、10号峰0.9914-0.9934、12号峰1.0956-1.1016。