[发明专利]共价结合寡核苷酸链的二氧化硅微球及其制备方法

权利要求书

1.一种共价结合寡核苷酸链的二氧化硅微球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

A.二氧化硅微球表面修饰氨基

将二氧化硅微球配制成10mg/mL～200mg/mL的二甲苯悬浮液；加入硅烷化试剂，硅烷化试剂在混合液中的体积浓度为10％以下，充分反应，使二氧化硅微球表面修饰上氨基；所述的二氧化硅微球粒径为500nm～5um；

B.激活二氧化硅微球

将步骤A获得的表面修饰上氨基的二氧化硅微球悬浮在乙腈中，微球的质量浓度为10mg/mL～200mg/mL；加入二异丙基乙胺和三聚氰氯，摇晃反应，加入的二异丙基乙胺浓度为0.3M，三聚氰氯浓度为0.1M；用乙腈清洗去除多余反应物，再让二氧化硅微球悬浮在硼酸钠缓冲液中，调pH值至7.5～8.5；

C.二氧化硅微球共价连接寡核苷酸链

将100nmol待连接的寡核苷酸链干粉用2M的氯化钠溶液溶解，与步骤B获得的二氧化硅微球硼酸钠悬浮液混合，其中二氧化硅微球含量为10～100mg，震荡反应5-8小时后进行1000～3000rpm离心处理，保留上清液；清洗、干燥。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤A中，硅烷化试剂选自3-氨丙基三甲氧基硅烷、3-氨丙基三乙氧基硅烷。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤A中，硅烷化试剂在混合液中的浓度为0.1％～2.5％。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤B中，微球的质量浓度为100mg/mL。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤B中，硼酸钠缓冲液浓度为0.05M～2M。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤C中，寡核苷酸链的长度为10mer～200mer，末端修饰氨基。

7.一种如权利要求1-6任一所述的制备方法制备得到的共价结合寡核苷酸链的二氧化硅微球。

8.一种如权利要求7所述的共价结合寡核苷酸链的二氧化硅微球在制备生物芯片中的应用。