[发明专利]一种鉴别非小细胞肺癌亚型的环状RNA组合物标志物及其应用

说明书

本申请公开了一种诊断及鉴别非小细胞肺癌亚型的环状RNA组合物标志物及其应用，包括hsa_circ_0069841、hsa_circ_001357及hsa_circ_001357与hsa_circ_0069841的组合在鉴别非小细胞肺癌亚型中的应用，还提供了一种通过检测hsa_circ_0069841、hsa_circ_001357及其与hsa_circ_0069841组合的试剂制成的试剂盒和基因芯片。本申请发现hsa_circ_0069841和hsa_circ_001357能单独或组合对非小细胞肺癌中的肺腺癌与肺鳞癌鉴别具有显著的特异性和敏感性，且诊断速度快、成本低、结果准确可靠，通过上述制备的试剂盒和基因芯片有助于对肺癌亚型进行快速准确的鉴别，为非小细胞肺癌患者进行靶向治疗提供可靠依据。

技术领域

本发明涉及医药和临床诊断技术领域，具体来说是一种鉴别非小细胞肺癌亚型的环状RNA组合物标志物及其应用。

背景技术

恶性肿瘤已成为严重威胁人类健康的一类重大高危疾病。肺癌的病发率和死亡率在世界范围内都居于所有恶性肿瘤的首位。

肺癌中，非小细胞肺癌(NSCLC)是临床中最常见的肺癌病理类型，包括鳞状细胞癌(鳞癌)、腺癌、大细胞癌，与小细胞癌相比其癌细胞生长分裂较慢,扩散转移相对较晚。约占肺癌发病率的85％。受限于缺少高特异性及灵敏度的早期筛查手段，约75％病人确诊时已发生局部或远端转移，由于病变范围广泛，中晚期肺部肿瘤往往难以得到根治，5年生存率仍不足20％。因此，寻找和研发特异性强、灵敏度高的生物标志物对于肺癌的早期诊断具有重大意义。

在人类基因组序列中，只有不到2％是编码序列，其余全为非编码序列，因此大多数转录物是非编码RNA。越来越多的研究表明非编码RNA在生命调控过程、疾病发生发展中都扮演了重要角色。circRNA是一类以共价键结构形成，不具有3'和5'末端头尾结构的非编码RNA，主要位于细胞质或储存于外泌体中，不受RNA外切酶影响，表达更稳定且不易降解，已被证明广泛存在于多种真核生物体内。大多数circRNA是由外显子环化而成，也有部分circRNA是由内含子环化而成的套索结构。同时由于circRNA含有大量的miRNA应答原件(MREs)，能与AGO蛋白形成RNA诱导沉默复合体(RISC)的催化核心，最终导致circRNA降解。根据来源，circRNA可大致分为四类∶全外显子型的circRNA，内含子和外显子组合的EIcircRNA，内含子组成的套索型ciRNA，由病毒RNA基因组、tRNA、rRNA、snRNA等环化产生的circRNA。

circRNA的异常表达会导致包括癌症在内的多种疾病的发生。现有研究表明circRNA从表观遗传调控、增殖、凋亡、转移、DNA损伤修复、信号转导等途径参与了肿瘤发生发展的全过程，可作为疾病的生物标志物，在临床诊断和治疗方面有广阔的应用前景。

对于现有技术中，也提出了通过环状RNA进行肺癌诊断以及治疗的作用，如专利号为202010227453.3的中国专利“一种环状RNA及其应用”，给出了通过改变环状RNAcirc_0058040的表达对非小细胞肺癌细胞的增殖、凋亡以及药物敏感性等产生影响，说明降低环状RNAcirc_0058040表达能够抑制非小细胞肺癌细胞增殖，增强其对靶向药物的敏感性，但是没有说明哪种基因可以对肺癌生物标志物进行准确检测检测。而专利号为CN202010654555.3的“一种检测NSCLC的诊断试剂盒及其使用方法与应用”其中虽然给出了hsa_circ_0069841基因能够检测NSCLC的生物标志物，但是没有办法对肺癌的具体类型进行分辨，而具体针对于NSCLC，鳞癌和腺癌的组织学来源、细胞生长速度、出现转移的快慢以及治疗方式均是完全不同的，因此，对于患者来说，依然缺乏一种快速有效的技术手段，来判断患者患上了鳞癌还是腺癌，以便医生更好的制定治疗方案。

发明内容

本发明的目的在于解决上述问题中现有技术的不足，提供一种能够鉴别肺癌亚型的环状RNA组合物标志物及其应用