[发明专利]脐带间充质干细胞及其制备方法

说明书

本发明涉及一种脐带间充质干细胞及其制备方法。该制备方法包括以下步骤：(1)对片状的脐带组织进行打孔；(2)将细胞焦亡产物置于步骤(1)所述打孔形成的孔内，进行预培养；(3)去除孔内的所述细胞焦亡产物，再将所得脐带组织进行培养；所述细胞焦亡产物包括细胞焦亡后所产生的细胞焦亡分泌物、细胞焦亡提取物和焦亡细胞中的至少一种。本发明方法可以在短时间内获取大量性状优良的脐带间充质干细胞，且该方法操作流程简单，实验结果稳定，每一批培养获得的细胞性状之间无明显差异。

技术领域

本发明涉及干细胞培养领域，特别是涉及一种脐带间充质干细胞及其制备方法。

背景技术

干细胞是一种具有自我复制能力和分化潜能的细胞，且在一定条件下可以分化为多种功能细胞。根据分化潜能的不同可以分为全能干细胞、多能干细胞和专能干细胞。虽然多能干细胞不具备形成完整给体的潜能，但是多能干细胞具有分化为不同胚层细胞的分化潜能，且没有伦理的限制，尤其是属于多能干细胞的间充质干细胞，发现具有低免疫原性、旁分泌特性和具有免疫调节的作用，越来越受到研究者重视，在临床治疗领域显示出光明的应用前景。间充质干细胞广泛分布于骨髓、脂肪、脐带血和脐带中。其中脐带来源的间充质干细胞因其来源广泛、采集方便和无创取材方式，使脐带间充质干细胞成为间充质干细胞研究的理想来源。

脐带间充质干细胞可以从脐带组织的上皮层、沃顿胶、血管周围组织和脐带血中分离得到，其中沃顿胶、血管周围组织和脐带血是脐带间充质干细胞的主要来源。另外脐带间充质干细胞具有以下特性：1.具有强大的增殖能力和多向分化潜能。脐带间充质干细胞经过多次传代后仍具有良好的干性，在适宜体内环境或在体外培养条件下施加适当的诱导条件，脐带间充质干细胞可以分化为三种胚胎来源的细胞。例如脐带间充质干细胞可以分化为内胚层来源的肝细胞、中胚层来源的心肌细胞和外胚层来源的神经细胞。2.免疫原性低，脐带间充质干细胞不表达MHC-II及共刺激分子CD80和CD86，且MHC-I类分子水平较低，显示出极低的免疫原性。3.具有免疫调节功能，脐带间充质干细胞阳性表达免疫抑制分子HLA-G、吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)和前列腺素E2(PGE2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)，从而抑制单核细胞的TNF-α过度分泌和T淋巴细胞的过度增殖，实现减轻炎症反应，抑制机体过度的免疫反应。4.组织修复作用，脐带间充质干细胞可以通过旁分泌作用向环境中释放胰岛素样生长因子(IGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)、转化生长因子-β(TGF-β)等生长因子，促进细胞的生长和组织的再生。以上特性显示出脐带间充质干细胞在自身免疫病、组织修复等领域具有巨大治疗潜力