[发明专利]一种Cblac-Mut8漆酶突变体有效
| 申请号： | 202011399467.X | 申请日： | 2020-12-04 |
| 公开（公告）号： | CN114606209B | 公开（公告）日： | 2023-09-29 |
| 发明（设计）人： | 毛国涛;宋安东;王方园;王杰;王风芹;谢慧;张宏森 | 申请（专利权）人： | 河南农业大学 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C02F3/34;C02F101/30;C12R1/19 |
| 代理公司： | 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104 | 代理人： | 杨海霞 |
| 地址： | 450002 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 cblac mut8 突变体 | ||
【权利要求书】：
1.一种Cblac-Mut8漆酶突变体，其特征在于：所述Cblac-Mut8漆酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
2.一种制备权利要求1所述Cblac-Mut8漆酶突变体的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
1）蛋白序列预测：将Cblac漆酶的氨基酸序列利用SWISS-MODEL进行结构模拟，将建模结果提交至PROSS软件进行突变位点预测，得到如SEQ ID NO.3所示的突变体蛋白序列；
2）重组载体构建：根据编码原则合成该蛋白的基因序列，将该基因序列与表达载体进行重组，获得重组载体；
3）蛋白表达与纯化：将重组载体在细菌感受态细胞中过量表达后收集、破碎，40~60℃孵育10~60 min，离心收集沉淀，用亲和层析柱纯化即得Cblac-Mut8漆酶突变体；
所述Cblac漆酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.如权利要求2所述制备Cblac-Mut8漆酶突变体的方法，其特征在于：步骤2）中的表达载体为pET-28a质粒；步骤3）中的细菌感受态细胞为大肠杆菌BL21(DE3)。
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