[发明专利]一种Rh血型抗原检测卡及制备方法在审
申请号: | 202011399714.6 | 申请日: | 2020-12-04 |
公开(公告)号: | CN112684176A | 公开(公告)日: | 2021-04-20 |
发明(设计)人: | 茅培华;范迎辉;李颖 | 申请(专利权)人: | 上海润普生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N33/531 |
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地址: | 202150 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 rh 血型 抗原 检测 制备 方法 | ||
1.一种Rh血型抗原检测卡,其特征在于:包括八个微柱凝胶管,八个所述凝胶管包括两管含有IgM 性质的单克隆抗C抗体的凝胶管、两管含有IgM 性质的单克隆抗c抗体的凝胶管、两管含有IgM性质的单克隆抗E抗体的凝胶管以及两管含有IgM性质的单克隆抗e抗体的凝胶管。
2.根据权利要求1所述的一种Rh血型抗原检测卡,其特征在于:每个所述微柱凝胶管均包括IgM性质的单克隆抗抗体、抗体稀释剂和葡聚糖凝胶;所述抗体稀释剂包括以下组分:
磷酸二氢钠 0.2-0.6g/L;
磷酸氢二钠 0.2-0.6g/L;
糖类 8-12g/L;
卵磷脂 6-8 g/L;
钠盐 3-5g/L;
泊洛沙姆 0.01-0.05g/L;
纳他霉素 15-18mg/L。
3.根据权利要求2所述的一种Rh血型抗原检测卡,其特征在于:所述抗体稀释剂包括以下组分:
磷酸二氢钠 0.3-0.5g/L;
磷酸氢二钠 0.3-0.5g/L;
糖类 9-11g/L;
卵磷脂 6.5-7.5 g/L;
钠盐 3.5-4.5g/L;
泊洛沙姆 0.02-0.04g/L;
纳他霉素 16-17mg/L。
4.根据权利要求2或3所述的一种Rh血型抗原检测卡,其特征在于:所述糖类选用麦芽糖、松三糖和香菇多糖的混合物或海藻糖、麦芽糖、蔗糖中的一种。
5.根据权利要求4所述的一种Rh血型抗原检测卡,其特征在于:所述麦芽糖、松三糖和香菇多糖混合物中三者的质量浓度比为1:(0.5-1):(0.1-0.2)。
6.根据权利要求2或3所述的一种Rh血型抗原检测卡,其特征在于:所述钠盐选用氯化钠、柠檬酸钠中的一种或两种,氯化钠和柠檬酸钠混合的质量浓度比为1:(0.5-2)。
7.一种权利要求1-6任一所述的Rh血型抗原检测卡的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
S1.抗体稀释液的配制:称取规定量的磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、糖类、卵磷脂、钠盐、泊洛沙姆、纳他霉素溶于水中,调节溶液pH至6-7;
S2.凝胶的制备:聚丙烯酰胺葡聚糖粉末采用4-6倍体积的生理盐水浸泡24-48h,然后洗涤3-5次,除去凝胶破损碎片和聚集的凝胶颗粒,收集颗粒大小均匀且完整呈球形凝胶颗粒,得到葡聚糖凝胶;
S3. 抗体稀释:采用步骤S1配制的抗体稀释剂对IgM性质的单克隆抗C抗体、IgM性质的单克隆抗c抗体、IgM性质的单克隆抗E抗体、IgM性质的单克隆抗e抗体分别进行稀释,稀释后的IgM性质的单克隆抗C抗体的效价≥64、IgM性质的单克隆抗c抗体的效价≥64、IgM性质的单克隆抗E抗体的效价≥64、IgM性质的单克隆抗e抗体的效价≥64;
S4.凝胶的配制:将步骤S3稀释后的四种抗体分别与步骤S2制备的葡聚糖凝胶按体积比为(1-5):1的比例混合,分别制备得到含IgM性质的单克隆抗C抗体的凝胶、含IgM性质的单克隆抗c抗体的凝胶、含IgM性质的单克隆抗E抗体的凝胶、含IgM性质的单克隆抗e抗体的凝胶;
S5.分装:将步骤S4制备的四种带有抗体的凝胶分别加入到不同微柱管中,每种凝胶分装两管,形成八个微柱凝胶管的Rh血型抗原检测卡。
8.根据权利要求7所述的一种Rh血型抗原检测卡的制备方法,其特征在于:步骤S2中,聚丙烯酰胺葡聚糖的粒径为20-50nm。
9.根据权利要求7所述的一种Rh血型抗原检测卡的制备方法,其特征在于:步骤S2中,浸泡后的聚丙烯酰胺葡聚糖采用生理盐水洗涤1-2次,再采用蒸馏水洗涤2-3次。
10.根据权利要求7所述的一种Rh血型抗原检测卡的制备方法,其特征在于:步骤S5中,每个微柱管分装20-25μL凝胶。
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