[发明专利]蛋白质O-岩藻糖基转移酶OsPOFUT1编码基因及其酶和制备与应用

权利要求书

1.一种蛋白质O-岩藻糖基转移酶OsPOFUT1的编码基因，其核苷酸序列具有如下特征中的一种或二种以上：

1)具有序列表中SEQ ID NO.1的脱氧核糖核酸(DNA)序列；

2)编码SEQ ID NO.2氨基酸序列的脱氧核糖核酸(DNA)序列；

3)对序列表中SEQ ID NO.1的脱氧核糖核酸(DNA)序列进行一个或两个以上核苷酸取代、缺失或添加而得到的编码具有蛋白质O-岩藻糖基转移酶活性的核苷酸序列。

2.一种权利要求1所述的蛋白质O-岩藻糖基转移酶OsPOFUT1的编码基因编码的蛋白质O-岩藻糖基转移酶，其特征在于：其氨基酸序列具有如下特征中的一种或二种：

1)序列表中SEQ ID NO.2从氨基端开始的氨基酸残基序列；

2)对序列表中SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列进行一个或两个以上氨基酸取代、缺失或添加而形成的具有蛋白质O-岩藻糖基转移酶活性的氨基酸序列。

3.按照权利要求2所述的蛋白质O-岩藻糖基转移酶，其特征在于：该酶具有将二磷酸鸟苷-岩藻糖(GDP-Fucose)以O-糖肽键形式转移到具有表皮生长因子样重复序列(EpidermalGrowth Factor Repeat)蛋白质上的活性。

4.一种权利要求2或3所述的蛋白质O-岩藻糖基转移酶的制备方法，其特征在于：是将蛋白质O-岩藻糖基转移酶OsPOFUT1的编码基因克隆入重组表达载体，导入宿主细胞，获得重组表达的蛋白质O-岩藻糖基转移酶；

上述蛋白质O-岩藻糖基转移酶OsPOFUT1的编码基因，其核苷酸序列具有如下特征中的一种或二种以上：

1)具有序列表中SEQ ID NO.1的脱氧核糖核酸(DNA)序列，

2)编码SEQ ID NO.2氨基酸序列的脱氧核糖核酸(DNA)序列，

3)对序列表中SEQ ID NO.1的脱氧核糖核酸(DNA)序列进行一个或两个以上核苷酸取代、缺失或添加而得到的编码具有蛋白质O-岩藻糖基转移酶活性的核苷酸序列；

所述的重组表达蛋白质O-岩藻糖基转移酶的表达载体，是指大肠杆菌表达载体、酵母表达载体、枯草杆菌表达载体、乳酸菌表达载体、链霉菌表达载体、噬菌体载体、丝状真菌表达载体、植物表达载体、昆虫表达载体或哺乳动物细胞表达载体中的一种或二种以上。

5.按照权利要求4所述方法，其特征在于：用于重组表达蛋白质O-岩藻糖基转移酶的重组菌或转基因细胞系，是指大肠杆菌宿主细胞Escherichia coli BL21、Escherichia coliJM109、Escherichia coli DH5α，酵母菌宿主细胞Saccharomyces cerevisiae、Pichiapastoris、Kluyveromyceslactis，枯草杆菌宿主细胞Bacillus subtilis R25、Bacillussubtilis 9920，乳酸菌宿主细胞Lactic acid bacteria COCC101，放线菌宿主细胞Streptomycesspp，丝状真菌宿主细胞Trichoderma viride、Trichoderma reesei、Aspergillus niger、Aspergillus nidulans，昆虫细胞Bombyxmori、Antharaeaeucalypti，哺乳动物细胞中国仓鼠卵巢细胞CHO、幼小仓鼠肾脏细胞BHK、中国仓鼠肺细胞CHL中的一种或二种以上。

6.一种权利要求1所述的蛋白质O-岩藻糖基转移酶的应用，其特征在于：将O-岩藻糖基转移酶OsPOFUT1编码基因为靶标进行植物品种改良，将OsPOFUT1在水稻或其他植物中敲除、过表达、一个或多个碱基的基因突变用于品种改良，或通过外源添加抑制剂或激活剂调控蛋白O-岩藻糖基转移酶用于植物品种改良。