[发明专利]一种细菌外膜囊泡、包含该细菌外膜囊泡的通用纳米疫苗及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 202011407688.7 | 申请日： | 2020-12-04 |
| 公开（公告）号： | CN112472802B | 公开（公告）日： | 2022-04-26 |
| 发明（设计）人： | 聂广军;赵潇;程科满;赵宇亮 | 申请（专利权）人： | 国家纳米科学中心 |
| 主分类号： | A61K39/39 | 分类号： | A61K39/39;A61K39/385;A61K39/00;A61P35/00;B82Y5/00;B82Y40/00 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细菌 外膜囊泡 包含 通用 纳米 疫苗 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种细菌外膜囊泡，其特征在于，所述细菌外膜囊泡通过如下方法制备得到：
将SpyCatcher蛋白和SnoopCatcher蛋白的编码基因通过基因重组的方式和ClyA蛋白的编码基因重组后，在革兰氏阴性菌中融合表达得到细菌外膜囊泡。
2.权利要求1所述细菌外膜囊泡在制备疫苗佐剂中的应用。
3.一种通用纳米疫苗，其特征在于，所述通用纳米疫苗包含权利要求1所述细菌外膜囊泡，以及和所述细菌外膜囊泡以异肽键或共价键-异肽键形式连接的抗原，所述抗原携带SpyTag和/或SnoopTag。
4.根据权利要求3所述的通用纳米疫苗，其特征在于，所述SpyTag包含如下氨基酸序列：
缬氨酸-脯氨酸-苏氨酸-异亮氨酸-缬氨酸-甲硫氨酸-缬氨酸-天冬氨酸-丙氨酸-酪氨酸-赖氨酸-精氨酸-酪氨酸-赖氨酸，和/或，
所述SnoopTag包含如下氨基酸序列：
甘氨酸-赖氨酸-亮氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-异亮氨酸-谷氨酸-苯丙氨酸-异亮氨酸-赖氨酸-缬氨酸-天冬酰胺-赖氨酸-甘氨酸-酪氨酸。
5.根据权利要求3所述的通用纳米疫苗，其特征在于，所述通用纳米疫苗的粒径为20~40nm。
6.根据权利要求3-5任一项所述的通用纳米疫苗，其特征在于，所述抗原为肿瘤特异性抗原。
7.权利要求3-6任一项所述通用纳米疫苗的制备方法，其特征在于，包括：
将SpyCatcher蛋白和SnoopCatcher蛋白的编码基因通过基因重组的方式和ClyA蛋白的编码基因重组后，在革兰氏阴性菌中融合表达得到细菌外膜囊泡；
将携带有SpyTag和/或SnoopTag的抗原和所述细菌外膜囊泡混合。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述抗原和所述细菌外膜囊泡的质量比为1:1~4。
9.根据权利要求7或8所述的方法，其特征在于，所述革兰氏阴性菌为肠道沙门氏菌、脑膜炎奈瑟菌、鼠伤寒沙门氏菌、志贺氏杆菌、大肠杆菌或霍乱弧菌中的一种或多种。
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