[发明专利]用于Septin9基因甲基化检测的荧光定量PCR检测试剂盒及其应用在审
| 申请号： | 202011408171.X | 申请日： | 2020-12-03 |
| 公开（公告）号： | CN112501297A | 公开（公告）日： | 2021-03-16 |
| 发明（设计）人： | 冯德峰;其他发明人请求不公开姓名 | 申请（专利权）人： | 广东辉锦创兴生物医学科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京汉鼎理利专利代理事务所(特殊普通合伙) 11618 | 代理人： | 潘满根 |
| 地址： | 528318 广东省佛山市顺德区龙江镇东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 septin9 基因 甲基化 检测 荧光 定量 pcr 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种用于Septin9基因甲基化检测的荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括一对甲基化扩增引物和二条甲基化检测探针，所述一对甲基化扩增引物用于扩增Septin9基因启动子到第1-3外显子的序列中一段CpG序列富集区域，该段CpG序列富集区域是一个PCR反应所扩增的序列，该段CpG序列富集区域中具有至少8个甲基化的CpG序列；所述二条探针分别用于检测PCR扩增产物的正链和负链，两条探针都使用相同的荧光报道基团和淬灭基团。
2.根据权利要求1所述的荧光定量检测试剂盒，其特征在于，在所述一对甲基化扩增引物扩增的一个PCR反应所扩增的序列内，所述至少8个甲基化的CpG序列中至少2个甲基化的CpG序列用于检测PCR扩增产物的正链探针，至少2个甲基化的CpG序列用于检测PCR扩增产物的负链探针。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述Septin9基因启动子到第1-3外显子的序列中一段CpG序列富集区域长度在200个碱基序列内。
4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述一对甲基化扩增引物用于扩增Septin9基因转录起始碱基上游2847至上游2745碱基的一段CpG序列富集区域，该区域序列为SEQ ID NO:1：
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述一对甲基化扩增引物的上游引物是SEQ ID NO:2：GGGAGGTCGGTGCGGGTGC，下游引物是SEQ ID NO:3：ATAAAAAAAAAAAACGAACGCC；所述两条甲基化检测探针中正向探针是SEQ ID NO:4：TGATTCGTTCGGGAGGCGGG，和反向探针是SEQ ID NO:5：CGCTACGCCCCCGCC。
6.根据权利要求1-5任一所述的试剂盒在检测大肠癌中的应用。
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