[发明专利]紫外线消毒盒杀菌率验证方法

权利要求书

1.一种紫外线消毒盒杀菌率验证方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：制作灭菌培养基与试剂：将胰酪大豆胨液体培养基、沙氏葡萄糖液体培养基、胰酪大豆胨琼脂培养基以及沙氏葡萄糖琼脂培养基在高温高压蒸汽炉内处理灭菌后备用并制备浓度为0.9％的氯化钠稀释液、洗脱液；

S2：物体表面灭菌；对即将消毒杀菌的物体进行清洗、干燥，高温高压灭菌，检测物体表面为无菌状态；

S3：菌悬液制备：通过菌种传代方法制备菌试管斜面，接种环刮取菌的新鲜培养物于装有5ml的上述浓度氯化钠试管中初步制成菌悬液，再与麦氏比浊管粗测其含菌浓度，将菌液进行活菌计数，并用上述浓度的氯化钠稀释液稀释成含菌量为5×105～5×106cfu/mL的菌悬液，确定菌落的数量；

S4：菌片制备：吸取滴注步骤S3中的菌悬液于步骤S2中已灭菌的物体表面最难杀菌的位置并平放于灭菌平皿中，然后置于37℃恒温箱中30min进行烘干处理；

S5：菌数实验：分为紫外线消毒盒试验组和阳性对照组，其中，

紫外线消毒盒试验组为：将步骤S4中的染菌物体放入紫外线消毒盒中消毒后用上述浓度的氯化钠试剂洗脱，吸取至培养皿中，作平板倾注，接种两个平板进行培养，平板计数；

阳性对照组为：将步骤S4中的染菌物体直接置上述浓度的氯化钠试剂洗脱，吸取至培养皿中，作平板倾注，接种两个平板进行培养，平板计数；

S6：结果判定，根据杀菌率的计算公式：

杀菌率达到目标判定则为合格。

2.根据权利要求1所述的紫外线消毒盒杀菌率验证方法，其特征在于，所述步骤S1中高温高压蒸汽炉的温度为121℃，时间为20min。

3.根据权利要求1所述的紫外线消毒盒杀菌率验证方法，其特征在于，所述步骤S3中的菌悬液制备方法制备的菌悬液包含金黄色葡萄球菌的菌悬液、大肠杆菌的菌悬液，绿脓假单胞菌的菌悬液以及白色念珠菌的菌悬液。

4.根据权利要求3所述的紫外线消毒盒杀菌率验证方法，其特征在于，所述步骤S4中吸取0.1ml含菌量为5×106cfu/mL的菌悬液在已灭菌的物体表面，滴注面积为2×3cm，载体回收菌量为5×105cfu/个。

5.根据权利要求4所述的紫外线消毒盒杀菌率验证方法，其特征在于，所述步骤S4中，在已灭菌的物体表面种菌类型分别为金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，绿脓假单胞菌的细菌繁殖体和白色念珠菌的真菌繁殖体。

6.根据权利要求5所述的紫外线消毒盒杀菌率验证方法，其特征在于，所述步骤S5中，紫外线消毒盒试验组将染菌物体放入紫外线消毒盒中的消毒时间为60s，用100ml的0.9％的氯化钠试剂洗脱，吸取1ml至培养皿中。

7.根据权利要求6所述的紫外线消毒盒杀菌率验证方法，其特征在于，所述步骤S5中，细菌繁殖体：金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，绿脓假单胞菌的培养温度为30℃～37℃，培养时间为3天；真菌：白色念珠菌的培养温度为20℃～25℃，培养时间为5天。