[发明专利]一种乳酸菌溶胞物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种乳酸菌溶胞物，其特征在于，按重量份折干计，含有蛋白类物质和肽聚糖，其中，所述蛋白类物质为40-70份，所述肽聚糖含量为30-60份，其中，蛋白类物质中含有多肽，所述多肽占蛋白类物质的50-90wt％。

2.根据权利要求1所述的乳酸菌溶胞物，其中，按重量份折干计算，含有蛋白类物质为45-65份，其中优选蛋白质含量55份，肽聚糖35-55份，优选肽聚糖含量40份；其中，蛋白类物质中含有多肽，所述多肽占蛋白类物质的80wt％。

3.根据权利要求1或2所述的乳酸菌溶胞物，其中，所述自由基清除率相比等量乳酸菌菌体提高100-200％，优选的，酪氨酸酶抑制率提升80％-200％，更优选的，小鼠NK细胞活性提高40-100％。

4.权利要求1-3任一项所述的乳酸菌溶胞物的制备方法，其中，包括如下步骤：

步骤1：乳酸菌原料经过扩大培养得到乳酸菌发酵液；

步骤2：步骤1得到的乳酸菌发酵液经过离心洗涤处理；

步骤3：步骤2经过离心洗涤处理后的乳酸菌发酵液进行破壁处理得到乳酸菌破壁液；

步骤4：步骤3得到的乳酸菌破壁液进行酶解后处理，即得到乳酸菌溶胞物。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其中，所述步骤1中的乳酸菌原料包括乳杆菌和/或双歧杆菌，优选双岐杆菌。

6.根据权利要求4或5所述的制备方法，其中，所述乳杆菌包括戊糖乳杆菌，干酪乳杆菌，嗜酸乳杆菌，植物乳杆菌，鼠李糖乳杆菌和短乳杆菌中的一种或两种以上；优选的，所述双歧杆菌包括长双歧杆菌和/或短双歧杆菌，更优选的，所述双歧杆菌为短双岐杆菌。

7.根据权利要求4-6中任一项所述的方法，其中，所述步骤1中将挑取乳酸菌原料于MRS液体培养基中进行培养。

8.根据权利要求4-7中任一项所述的方法，其中，所述步骤1中的培养温度为32-40℃，优选为35℃。

9.根据权利要求4-8所述的方法，其中，所述步骤1中的培养为厌氧或兼性厌氧培养，优选的，当OD值为15-30时结束，得到所述乳酸菌发酵液。

10.根据权利要求4-9中任一项所述的方法，其中，所述步骤2中离心处理的转速为5000-10000r/min，优选为10000r/min。

11.根据权利要求4-10中任一项所述的方法，其中，所述步骤2中还包括离心处理后的洗涤步骤，其中，所述洗涤步骤为生理盐水进行溶解菌体，所述菌体与生理盐水的质量体积比为10-50wt/mL％；和/或所述洗涤温度为0-25℃，优选为10℃；和/或所述洗涤次数为1-5次，优选为3次。

12.根据权利要求4-11所述的方法，其中，所述步骤3中破壁处理中的步骤2得到的乳酸菌菌体与水的质量体积比为1:100-1:5，加热灭活的温度为70-130℃，时间为3s-120min，优选的，破壁处理中，乳杆菌和双歧杆菌的质量比为1:20-20:1，优选为1:2。

13.根据权利要求4-12中任一项所述的方法，其中，所述步骤3中破壁处理的方法包括超声破碎，高压均质和酶解破壁中的一种或两种以上，优选为超声破碎。

14.根据权利要求13所述的方法，其中，所述超声破碎的功率为60-200W，时间为15-60min，优选破壁功率150w，时间45min。

15.根据权利要求13所述的方法，其中，所述高压均质的压力为20-100MPa，流速为0.1-100m³/h，均质次数为1-5次；优选压力80MPa，流速10m³/h，均质3次。