[发明专利]金银花-青蒿-栀子提取物及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种金银花-青蒿-栀子提取物,其特征在于，由如下重量份的药物原料药提取而来：金银花3-15份，青蒿6-25份，栀子1-3份。

2.根据权利要求1所述的金银花-青蒿-栀子提取物,其特征在于，由如下重量份的药物原料药提取而来：金银花3份，青蒿15份，栀子2份。

3.权利要求1或2所述的金银花-青蒿-栀子提取物的制备方法,包括如下步骤:

将金银花、青蒿、栀子粉碎，过60目筛，按照重量配比称取金银花、青蒿、栀子粗粉，加入8倍量75﹪乙醇浸泡2h，室温超声提取20min，提取2次；抽滤，合并滤液；提取液40℃减压回收乙醇，搅拌过夜，得到粗提液，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取；

粗提液中加入体积比1:1的石油醚，轻微搅拌、振摇，静置分层，将残留物放入真空干燥箱低压干燥至恒重，得到石油醚部位；

石油醚萃取后的粗提液中加入体积比1:1的乙酸乙酯，轻微搅拌、振摇，静置分层，下层水相减压浓缩除乙酸乙酯，另置，收集乙酸乙酯层，40℃减压浓缩回收乙酸乙酯，浓缩液冷冻干燥，得到乙酸乙酯部位；

取水和正丁醇(105:500)置于分液漏斗中，振摇，静置分层，上层为水饱和正丁醇溶液；乙酸乙酯萃取后的粗提液中加入体积比1:1的水饱和正丁醇，轻微搅拌、振摇，静置分层，下层水相另置，收集正丁醇层，50℃减压浓缩除正丁醇，浓缩液冷冻干燥，得到正丁醇部位。

4.根据权利要求3所述的金银花-青蒿-栀子提取物的制备方法,其特征在于，包括如下步骤:

取石油醚部位硅胶湿法装柱，干法上样，上样后加脱脂棉覆盖；以石油醚-乙酸乙酯(10:0-7:3，v/v)梯度洗脱，每个梯度的洗脱体积为柱体积的2倍，流速25mL/min，每份按500mL收集；用TLC法对洗脱液进行检识，点样于薄层层析硅胶G板，展开剂为石油醚-乙酸乙酯，显色剂为5﹪香草醛硫酸；喷显色剂后吹风机加热，观察斑点，合并相同流分，得A-K共计11组流分，取H和J流分，即得。

5.根据权利要求3所述的金银花-青蒿-栀子提取物的制备方法,其特征在于，包括如下步骤:

取乙酸乙酯部位硅胶湿法装柱，干法上样，上样后加脱脂棉覆盖；以二氯甲烷-甲醇系统(10:0-7:3，v/v)梯度洗脱，每个梯度的洗脱体积为柱体积的2倍，流速20mL/min，按每份500mL收集；用TLC法对洗脱液进行检识，点样于薄层层析硅胶G板，展开剂二氯甲烷-甲醇，显色剂为5﹪香草醛硫酸乙醇和2﹪三氯化铁乙醇溶液，喷显色剂后吹风机吹干，紫外灯(365nm)下观察；合并相同流分，得到A-I共计9组流分，取E流分，即得。

6.根据权利要求3所述的金银花-青蒿-栀子提取物的制备方法,其特征在于，包括如下步骤:

称取D-101大孔吸附树脂，用95﹪的乙醇浸泡24h，上柱，用95﹪乙醇洗至洗脱液与水(1:5)混合不产生浑浊，再用水洗至无醇味，备用；正丁醇部位干浸膏加水超声分散上样，上样浓度0.7g/mL；依次用水、30﹪、60﹪、95﹪乙醇溶液洗脱，流速10mL/min；收集洗脱液，用TLC法对洗脱液进行检识，点样于薄层层析硅胶G板，展开剂为氯仿-甲醇-水＝65:35:10下层，显色剂为10﹪硫酸乙醇；取30﹪乙醇和60﹪乙醇洗脱产物，即得。

7.权利要求3所述的制备方法制备得到的金银花-青蒿-栀子提取物石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位在制备抗CV-A6药物中的应用。

8.权利要求4所述的制备方法制备得到的金银花-青蒿-栀子提取物石油醚部位H和J流分在制备抗CV-A6药物中的应用。

9.权利要求5所述的制备方法制备得到的金银花-青蒿-栀子提取物乙酸乙酯部位E流分在制备抗CV-A6药物中的应用。

10.权利要求5所述的制备方法制备得到的金银花-青蒿-栀子提取物正丁醇部位30﹪乙醇和60﹪乙醇洗脱产物在制备抗CV-A6药物中的应用。