[发明专利]外源基因可控表达的慢病毒包装方法

权利要求书

1.一种慢病毒包装载体，沿病毒基因组表达方向设置有位于上游的第一LTR和位于下游的第二LTR，所述第一LTR和所述第二LTR之间具有反向插入的基因表达盒；

所述基因表达盒包含顺次连接的启动子、阻遏型操作子以及任选的目的基因，当所述目的基因表达时会对病毒包装产生负面影响；

当有阻遏物存在时，所述阻遏型操作子能够阻遏其下游目的基因的表达；

其中，所述阻遏型操作子选自如下的转录调控系统元件：色氨酸操作子TrpO元件和/或Cumate-CuO可调控系统的CuO元件；

所述色氨酸操作子TrpO元件在所述基因表达盒的插入位置位于所述启动子的TATABOX下游，且距离所述启动子的TATA BOX小于等于18个核苷酸；其中，所述TrpO元件的序列为gaactagttaactagtacg；

所述Cumate-CuO可调控系统中的CuO元件的插入位置位于所述启动子的TATA BOX下游，且距离所述启动子的TATA BOX 40~50个核苷酸；其中，所述CuO元件的序列为aacaaacagacaatctggtctgtttgta。

2.根据权利要求1所述的慢病毒包装载体，所述慢病毒包装载体包括CMV-TrpO v2或CMV-CuO v1所示序列；

其中，CMV-TrpO v2所示序列如下：

cgttacataacttacggtaaatggcccgcctggctgaccgcccaacgacccccgcccattgacgtcaataatgacgtatgttcccatagtaacgccaatagggactttccattgacgtcaatgggtggagtatttacggtaaactgcccacttggcagtacatcaagtgtatcatatgccaagtacgccccctattgacgtcaatgacggtaaatggcccgcctggcattatgcccagtacatgaccttatgggactttcctacttggcagtacatctacgtattagtcatcgctattaccatggtgatgcggttttggcagtacatcaatgggcgtggatagcggtttgactcacggggatttccaagtctccaccccattgacgtcaatgggagtttgttttggcaccaaaatcaacgggactttccaaaatgtcgtaacaactccgccccattgacgcaaatgggcggtaggcgtgtacggtgggaggtctatataagcagaactagttaactagtacgtcagatcgcctggagacgccatccacgctgttttgacctccatagaagacaccgactctac；

CMV-CuO v1所示序列如下：

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