[发明专利]一种血小板功能检测试剂盒及血小板活化程度检测方法

权利要求书

1.一种血小板功能检测试剂盒，其特征在于，包括3种试剂：试剂1、试剂2、试剂3；试剂1采用单抗标记的磁珠、单抗选用抗血小板膜P-选组素单抗SZ-51或抗血小板膜GPIIb/IIIa单抗7E3；试剂2采用发光标记物标记的抗人血小板抗体；试剂3为诱导剂。

2.根据权利要求1所述的血小板功能检测试剂盒，其特征在于，所述发光标记物采用化学发光标记物；所述诱导剂采用血小板激活剂。

3.根据权利要求2所述的血小板功能检测试剂盒，其特征在于，所述发光标记物采用吖啶酯或鲁米诺；所述诱导剂采用二磷酸腺苷、花生四烯酸、肾上腺素或胶原。

4.一种血小板活化程度检测方法，其特征在于，所述检测方法通过对血小板活化程度绝对值进行检测计算，具体方法为：对样本进行血小板活化诱导处理，加入单抗标记的磁珠，与样本中已被活化的血小板结合形成活化血小板-磁珠复合物，采用磁分离的方法将活化血小板-磁珠复合物分离出来后，加入发光标记物标记的抗人血小板抗体后，激发发光标记物发光，通过测定发光标记物的发光量计算活化血小板数量。

5.根据权利要求4所述的血小板活化程度检测方法，其特征在于，所述血小板活化程度绝对值的检测方法如下：

(1)采用抗血小板膜P-选组素单抗SZ-51或抗血小板膜GPIIb/IIIa单抗7E3标记磁珠；

(2)采用发光标记物标记抗人血小板抗体；

(3)取待测样本抗凝全血或富血小板血浆，加入诱导剂，使血小板活化，加入步骤（1）中标记后的磁珠，与活化的血小板结合形成活化血小板-磁珠复合物；

(4)混匀后，采用磁分离的方法将活化血小板-磁珠复合物从待测样本中分离出来；

(5)向分离出来的活化血小板-磁珠复合物中加入缓冲液，使其重悬；然后加入发光标记物标记的抗人血小板抗体，形成抗体-活化血小板-磁珠复合物；

(6)测定发光标记物的发光量，计算活化血小板数量。

6.根据权利要求5所述的血小板活化程度检测方法，其特征在于，所述磁分离的方法通过采用电磁铁将活化血小板-磁珠复合物吸附在盛有待测样本的容器的器壁处，然后将容器内的待测样本弃去，除去电磁铁的磁性，此时仍保留在容器内的即为所述分离出的活化血小板-磁珠复合物。

7.根据权利要求6所述的血小板活化程度检测方法，其特征在于，所述发光标记物采用吖啶酯或鲁米诺；所述诱导剂采用二磷酸腺苷、花生四烯酸、肾上腺素或胶原。

8.根据权利要求7所述的血小板活化程度检测方法，其特征在于，所述步骤（1）采用抗血小板膜P-选组素单抗SZ-51标记磁珠；所述发光标记物采用吖啶酯；所述诱导剂采用二磷酸腺苷；所述步骤（3）中待测样本抗凝全血用量为0.2mL，诱导剂用量为0.02mL，标记后的磁珠用量为0.2mL；所述步骤（5）中发光标记物标记的抗人血小板抗体用量为0.1 mL。

9.根据权利要求8所述的血小板活化程度检测方法，其特征在于，所述步骤（6）中活化血小板数量的计算方法如下：对活化血小板数量与发光标记物发光量进行直线拟合，将测定发光标记物的发光量代入拟合直线中，即得所述活化血小板数量。

10.根据权利要求9所述的血小板活化程度检测方法，其特征在于，将计算得到的活化血小板数量与正常参考值进行比较，判断血小板活化程度；所述正常参考值为(40~130)×10⁹/L：当计算得到的活化血小板数量低于40×10⁹/L时，血小板活化程度低；当计算得到的活化血小板数量高于130×10⁹/L时，血小板活化程度高。