[发明专利]一种链霉菌及其发酵产假尿苷的方法

说明书

本发明公开了一种链霉菌(Streptomyces sp.)HDCC00030，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC NO.21122，保藏日期为2020年11月6日。所述链霉菌为一种全新的假尿苷产生菌，生产能力高，其产生假尿苷的能力比现有技术中其他菌种有了大幅度的提高，假尿苷的效价可达到1360mg/L以上，有利于实现工业化生产。

技术领域

本发明涉及工业微生物发酵技术领域，具体涉及一种链霉菌及其发酵产假尿苷的方法。

背景技术

1957年，DAVIS等在核糖体RNA(ribosomal RNA，rRNA)和转运RNA(transfer RNA，tRNA)中首次发现一种与尿嘧啶核苷天然结构类似的异构体，其核糖不与尿嘧啶(Uridine，U)N1相连，而与C5相连，形成假尿嘧啶核苷(Pseudouridine，PU)。(DAVISFF，ALLEN FW.Ribonucleic acids from yeast which contain a fifth nucleotide[J].JBiolChem，1957，227(2)：907-915.)尿苷通过假尿苷合酶从核糖糖碱基裂解并重新连接生成C-C糖苷键，异构化成假尿苷。尿嘧啶核苷与假尿嘧啶核苷化学结构式如式1和式2所示；

假尿苷是由假尿苷合酶催化得来的，这种酶在转录后将RNA中特定的尿苷异构化，这个过程被称为假尿苷化。假尿苷作为核苷酸代谢物，对其的研究越来越受到学者们的重视。假尿苷可作为一个潜在的生物标志物，用于肾病与肿瘤的诊断、疗效监测，而且对于其他疾病的诊断也有一定的参考意义。研究表明，β-Pseudouridine可以减少辐射引起的人类淋巴细胞染色体畸变。近年来，科学家推测假尿苷在 RNA稳定性和/或帮助氨基酰基转移酶与tRNAs相互作用方面发挥作用。另外，随着生物技术的飞速发展，利用核酸适配体、RNA干扰等手段发现的基因组药物引起了人们的兴趣，根据其特殊的生理功能，假尿苷被用作医药中间体，假尿苷的磷脒衍生物被用作合成此类低聚物的起始材料之一。

在假尿苷制备方面，现目前，只有传统的化学合成法可催化合成假尿苷，但是，针对假尿苷的化学合成，存在化学合成步骤长、收率低，且用到的试剂易燃易爆，较不安全等一系列的问题。在生物合成方面，尚未发现可专一大量用于假尿苷制备的微生物菌种和技术报道。因此，假尿苷的低成本便捷式获取存在一定的缺陷。

针对现有技术中假尿苷只能通过化学合成法制备，且化学合成过程中存在的合成步骤长、收率低，且用到的试剂易燃易爆，较不安全等一系列的问题，在此，本发明寻求一种新的微生物，并可通过简单的发酵和较低的成本实现假尿苷的生产。

发明内容

为了解决假尿苷现有制备方法不足的问题，本发明的目的之一在于提供一种新的假尿苷生产菌，该菌为链霉菌(Streptomyces sp.) HDCC00030，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，中国北京，保藏编号为CGMCC NO.21122，保藏日期为2020 年11月6日。

本发明的目的还在于提供了一种链霉菌(Streptomyces sp.) HDCC00030(CGMCCNO.21122)在制备假尿苷或者含有假尿苷的药物组合物的应用。

本发明还提供了一种假尿苷的制备方法，该方法包括采用链霉菌 (Streptomycessp.)HDCC00030(CGMCC NO.21122)在含有可同化的碳源和/或氮源的营养培养基里，进行有氧发酵的步骤。

在优选的实施方案中，上述可同化的碳源选自玉米淀粉、麦芽糊精、葡萄糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖、工业糖蜜、甘油、豆油、山梨醇、甘露醇之一或者上述物质任意几种的组合，优选玉米淀粉、麦芽糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇或者上述物质任意几种的组合。