[发明专利]一种从发酵液中分离提取番茄红素的方法

说明书

本发明公开了一种从发酵液中分离提取番茄红素的方法。该方法包括如下步骤：取含有番茄红素的发酵液，收集菌体；向菌体加入乙醇浸泡1‑3h，收集沉淀；用乙醇洗涤沉淀2次以上，收集菌粉；用50‑60℃乙酸乙酯萃取菌粉2‑4次，合并乙酸乙酯相，得到有机相；将有机相浓缩；然后加入乙醇，0‑4℃结晶，得到番茄红素晶体。采用本发明提供的方法从发酵液中分离提取番茄红素，纯度可达98％以上，收率可达75％以上。该方法分离纯化过程简单，产品纯度高，成本低，适合连续生产，符合工业化要求。本发明具有重要的应用价值。

技术领域

本发明属于生化分离技术领域，具体涉及一种从发酵液中分离提取番茄红素的方法。

背景技术

番茄红素是一种长链不饱和烯烃，类胡萝卜素的一种，它的抗氧化能力是β-胡萝卜素的3.2倍，是维生素E的100倍，能高效淬灭人体中的单线态氧和清除自由基，从而起到抗癌、抑癌作用及活化免疫细胞等功能，被称为“植物黄金”。

目前，番茄红素主要从植物中萃取，自然界植物以番茄中番茄红素含量最高，但含量也仅有约100mg/kg，大规模提取番茄红素会造成植物资源大量浪费，且植物成分复杂，造成提取产物纯度不高。因此，综合考虑到品质、技术、生产、资源成本等因素，从天然番茄中提取生产番茄红素的前景并不乐观。通过Wittig烯化反应可以人工合成番茄红素，但化学合成法工艺路线较长，反应条件比较苛刻，收率较低，同时产品带有大量的有毒物质残余，对食品安全产生很大影响。

微生物有生长繁殖快，生长周期短，产量高，杂质少，可以进行大规模生产的特点，可以克服番茄提取和化学法合成番茄红素的不足之处，非常适合用于工业化生产；其培养方法简单，原料来源丰富，价格低廉，经济效益高。

发明内容

本发明的目的是从发酵液中分离提取番茄红素。

本发明首先保护一种从发酵液中分离提取番茄红素的方法，依次包括如下步骤：

(1)取含有番茄红素的发酵液，收集菌体；

(2)取步骤(1)得到的菌体，加入乙醇浸泡1-3h(如1-2h、2-3h、1h、2h或3h)，收集沉淀；

(3)用乙醇洗涤步骤(2)收集的沉淀2次以上(如2次、3次)，收集菌粉；

(4)取步骤(3)得到的菌粉，用50-60℃(如50-55℃、55-60℃、50℃、55℃或60℃)乙酸乙酯萃取2-4次(如2-3次、3-4次、2次、3次或4次)，合并乙酸乙酯相，得到有机相；

(5)将步骤(4)得到的有机相进行浓缩；然后加入乙醇，0-4℃(如0-2℃、2-4℃、0℃、2℃或4℃)结晶，得到番茄红素晶体。

上述方法中，所述步骤(1)中，收集菌体的方式可为离心或过滤。

上述方法中，所述步骤(2)中，收集沉淀的方式可为离心或过滤。

离心可为管式离心机离心或碟片式离心机离心。离心速度不低于8000rpm。过滤可为板框过滤。

上述方法中，所述步骤(2)中，浸泡时，乙醇和菌体的比例可为1mL：0.8-1.2g(如1mL：0.8-1.0g、1mL：1.0-1.2g、1mL：0.8g、1mL：1.0g或1mL：1.2g)。

上述方法中，所述步骤(3)中，洗涤时，乙醇和沉淀的比例可为1mL：0.8-1.2g(如1mL：0.8-1.0g、1mL：1.0-1.2g、1mL：0.8g、1mL：1.0g或1mL：1.2g)。

上述方法中，所述步骤(3)中，每次洗涤的方法可为：向沉淀中缓慢加入乙醇淋洗，搅拌均匀并抽滤。