[发明专利]一种甜瓜抗白粉病相关SSR分子标记及应用

说明书

本发明公开了一种甜瓜抗白粉病相关SSR分子标记。本发明通过筛选在两个亲本(抗病和感病)和F2代两个极端分离池中存在的多态性引物，并通过自然群体验证，获得的与甜瓜抗白粉病基因紧密连锁的引物，所述SSR分子标记位于甜瓜2号染色体上，由一对引物构成，上游引物为：AGAGGTAGATTGTGTTCCG；下游引物为：GGGTAAAGATCATATAAAATC，扩增产物大小为300bp左右。上述SSR分子标记可以用于甜瓜抗白粉病材料筛选及分子标记辅助育种。本发明的SSR标记可以在甜瓜候选材料的任何阶段对其进行白粉病抗性鉴定和筛选，具有高效、限制少、准确的优点。

技术领域

本发明涉及一种甜瓜抗白粉病相关SSR分子标记及应用，属于植物抗病育种技术领域。

背景技术

甜瓜(Cucumis melo L.)属葫芦科(Cucurbitaceae)黄瓜属(Cucumis)一年生二倍体植物，其果实香脆清甜、风味独特、营养物质丰富，是一种世界范围内广泛种植的经济作物，已成为深受消费者欢迎的高档瓜果。目前甜瓜主栽品种在生产中极易受到各种病原菌的侵害，尤其是白粉病病害最为严重。甜瓜白粉病分布范围广，致病能力强，已成为世界性的甜瓜主要病害，是甜瓜绿色生产的主要障碍。因此，防治甜瓜抗白粉病是目前甜瓜产业亟待解决的重要问题。

现阶段甜瓜白粉病的防治仍然主要依靠大量喷洒各类化学药品。然而，大量化学试剂的使用不仅严重污染了生态环境，对人类身体健康造成一定威胁，还会导致病原菌产生耐药性，对防治工作造成更大的困难。因此，防治甜瓜白粉病最经济有效且环保的方法就是筛选抗白粉病材料，利用其本身抗性进行抗病新品种培育和推广。

目前，甜瓜育种领域比较常用的方法是杂交育种。然而，传统杂交育种方法选择周期长，抗病性鉴定工作繁琐，费时费力，造成育种成本比较高，严重制约了甜瓜育种进度。因此，发掘与抗白粉病基因紧密连锁的分子标记，利用分子标记技术辅助选择可提高抗病株系的选择效率，缩短育种周期，已逐渐成为甜瓜抗白粉病育种的新思路。

发明内容

本发明克服现有杂交育种甜瓜抗白粉病品种存在的选育效率低，费时费力的技术缺陷，通过基因型分析和表型鉴定，挖掘了一个与甜瓜抗白粉病信息紧密连锁的SSR分子标记，并成功应用于抗白粉病材料的选择，有助于进一步明确甜瓜抗白粉病信息遗传规律，为抗白粉病基因的精细定位和克隆奠定基础。

本发明的技术方案是：一种甜瓜抗白粉病相关SSR分子标记，其特征是，

所述SSR分子标记(CMACN213)位于甜瓜2号染色体上，由一对引物构成，上游引物为：AGAGGTAGATTGTGTTCCG；下游引物为：GGGTAAAGATCATATAAAATC。

本发明还公开了上述SSR分子标记在甜瓜抗白粉病材料筛选及分子标记辅助育种中的应用。

本发明还公开了一种甜瓜抗白粉病材料筛选的方法，其特征是，包括以下步骤：

(1)提取待筛选甜瓜抗白粉病材料叶片的基因组DNA；

(2)利用上述的SSR分子标记的上下游引物对甜瓜基因组DNA进行PCR扩增，并对PCR扩增产物进行电泳分析：

如果PCR扩增产物为345bp的DNA片段，则为甜瓜抗白粉病材料；

如果PCR扩增产物为328bp的DNA片段，则为甜瓜易感白粉病材料；

如果PCR扩增产物同时具有345bp和328bp的DNA片段，则为甜瓜抗白粉病材料和甜瓜易感白粉病材料的复合材料。

本发明的有益效果是：

1.本发明的SSR引物是通过筛选在两个亲本(抗病和感病)和F2代两个极端分离池中存在的多态性引物，并通过自然群体验证，获得的与甜瓜抗白粉病基因紧密连锁的引物。