[发明专利]新冠病毒单链抗体及质控品和制备方法

说明书

本发明涉及一种新冠病毒单链抗体及质控品和制备方法，从N段到C端依次包括轻链可变区和重链可变区，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明的新冠病毒单链抗体灵敏度高、稳定性好，非常适合质控品的制备。而且，在此可变区序列基础上进一步使用基因重组技术构建形成无CH1片段的人鼠嵌合IgM抗体，从而提高分子稳定性和特异性结合能力。本发明制备的新冠病毒单链抗体可应用于化学发光平台进行质控品检测，可以有效测定活性，能克服一般的2019‑nCoV IgM抗体检测灵敏度差、特异性低的缺陷。

技术领域

本发明涉及免疫检测技术领域，特别是涉及一种新冠病毒单链抗体及质控品和制备方法。

背景技术

2019新型冠状病毒(2019-nCoV)，2020年1月12日被世界卫生组织命名为“2019-nCoV”，2020年2月11日被国际病毒分类委员会命名为“严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)”。新型冠状病毒是以前从未在人体中发现的冠状病毒新毒株113。冠状病毒是一个大型病毒家族，已知可引起感冒以及中东呼吸综合征(MERS)和严重急性呼吸综合征(SARS)等较严重疾病。2019-nCoV与SARS病毒在整个基因组的相似度约为80％。从目前的认知来看，在毒性上，2019-nCoV比SARS弱，而在传染性上，因2019-nCoV潜伏期长，且无症状感染者也存在传染性，且人群全部易感，导致传播控制难度更大。基于日前的流行病学调查，该病潜伏期一般为3～7天，最短潜伏期是1天，最长潜伏期为14天，在潜伏期间依然具有传染性。该病能够在人与人之间传播，主要通过飞沫和接触传播，在密闭不通风的场所可能存在气溶胶传播风险。免疫能力低下的人群感染后病情较严重，儿童及婴幼儿也有发病。人感染了2019-nCoV后常见体征有呼吸道症状、发热、咳嗽、气促和呼吸困难等，在较严重病例中，感染可导致肺炎、严重急性呼吸综合征、肾衰竭，甚至死亡。

感染2019-nCoV后，人体在约7天左右会产生针对病毒的IgM抗体，约14天左右会产生针对病毒的IgG抗体。产生的抗体是一种保护性的抗体，能促进人体从病毒感染中恢复和自愈。2019-nCoV抗体检测已广泛应用于ELISA、胶体金、侧向层析、化学发光等平台，但一般的质控抗体因稳定性和灵敏度不足等原因，无法进行准确有效的测定。

发明内容

基于此，有必要提供一种稳定性和灵敏度较好的新冠病毒单链抗体。

一种新冠病毒单链抗体，从N端到C端依次包括轻链可变区和重链可变区，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

在其中一个实施例中，还包括依次连接于所述重链可变区的C端的人IgM抗体轻链恒定区和人IgM抗体重链恒定区。

在其中一个实施例中，所述人IgM抗体轻链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示，所述人IgM抗体重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。

本发明还提供了一种分离的核酸，其编码上述新冠病毒单链抗体。

在其中一个实施例中，包括序列如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的核苷酸片段。

在其中一个实施例中，包括序列如SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示的核苷酸片段。

本发明还提供了一种新冠病毒抗体质控品的制备方法，包括以下步骤：

将新冠病毒抗体与冻干保护溶液混合，得到抗体溶液；

将所述抗体溶液依次进行预冻处理、一次干燥处理和二次干燥处理，得到所述新冠病毒抗体质控品；