[发明专利]一种人呼吸道合胞病毒毒株及其应用

说明书

本发明公开了一种人呼吸道合胞病毒毒株及其应用，涉及病毒免疫领域。通过连续传代筛选获得了4株人呼吸道合胞病毒高毒性突变株，经过基因序列测定确定均为A亚型hRSV。该人呼吸道合胞病毒高毒性突变株遗传稳定性好，免疫动物后，免疫原性强。因此，该人呼吸道合胞病毒高毒性突变株可以用于减毒株的选育，筛选安全且免疫活性有效的减毒株，可以应用于感染小鼠并导致小鼠死亡，借此构建致死型hRSV感染动物模型，用于hRSV疫苗和抗hRSV药物的筛选评价。

技术领域

本发明涉及病毒免疫领域，具体而言，涉及一种人呼吸道合胞病毒毒株及其应用。

背景技术

目前，人呼吸道合胞病毒(human Respiratory Syncytial Virus，hRSV)尚无疫苗。而疫苗的研发面临如下的难题：感染者的年龄普遍较小(5岁以下)，导致疫苗的使用极为慎重；病毒有多种方式逃避宿主天然免疫；缺乏自然感染诱导的持久保护性免疫；在20世纪60年代研发的福尔马林灭活全病毒疫苗，在自然感染中接种疫苗的儿童出现以肺泡炎为标志的疾病加重症状，即疾病增强作用(enhanced RSV disease,ERD)，住院率明显增加，甚至引起死亡；此外，动物模型不能完全拟合人体内病毒的发病机制也影响了疫苗的研发。

目前，唯一获得许可预防hRSV感染的药物是帕利珠单抗，帕利珠单抗是针对该病毒F蛋白的人源化小鼠单克隆抗体，该疗法对早产儿和患有慢性疾病的婴儿较安全有效，但使用也十分局限，该疗法针对的对象必须是具有严格指征的高危人群(儿童)，且成本很高，在我国没有应用。

此外，现有药物(利巴韦林)存在毒性高、病毒变异快、病毒的耐药性增加等问题。现代医学仍不能开发安全而有效的hRSV疫苗或抗病毒药物，研发的一大瓶颈是缺乏能够拟合病毒在人体感染的合适动物模型。因该病毒亦可引起儿童或老年人、免疫力低下成年人的重症感染甚至死亡，因此筛选高毒性突变株hRSV尤为关键，从而借此构建致死性hRSV感染动物模型，用于hRSV疫苗和抗hRSV药物的筛选评价。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种人呼吸道合胞病毒毒株及其应用以解决上述技术问题。

本发明是这样实现的：

一种人呼吸道合胞病毒毒株，毒株为A亚型毒株，人呼吸道合胞病毒毒株选自如下毒株中的至少一种：毒株1、毒株2、毒株3和毒株4；

毒株1保藏编号为CCTCC NO：V201746；毒株2保藏编号为CCTCC NO：V201755；毒株3保藏编号为CCTCC NO：V202033；毒株4保藏编号为CCTCC NO：V202034。

针对目前尚无人呼吸道合胞病毒毒株疫苗问世，发明人筛选获得了一种高毒性突变株hRSV。该人呼吸道合胞病毒毒株包括4个毒株。4株病毒均可引起BALB/c小鼠感染后死亡，解决了hRSV疫苗研发中缺乏致死型动物模型的问题，为hRSV疫苗和抗hRSV药物的筛选评价提供了优秀的动物模型平台。

发明人通过在小鼠中连续传代一株临床分离的hRSV(KI株)，累积病毒突变后获得了4株hRSV高毒性突变株。KI株参照Ke Zhang,et al.Complete genome sequences of onehuman Respiratory Syncytial Antigenic Group A Virus from China and its fourmouse-adapted isolates记载的分离出的人类呼吸道合胞病毒株。

高毒株hRSV的筛选方法参照高毒性人呼吸道合胞病毒鼠适应株的筛选，中国病原生物学杂志记载的动物连续传代法的具体步骤。