[发明专利]一种膀胱癌检测试剂盒

说明书

本发明提供了一种膀胱癌检测试剂盒，其包含针对3、7、17号染色体和p16基因的检测探针中的至少一种；所述针对3、7、17号染色体和p16基因的检测探针分别包括A探针、B1探针、B2探针、C探针、D探针和E探针；其中，所述A探针从5’端到3’端的碱基组成为：P1序列、M1、特异性P2序列、M1、P1序列；所述B1探针为P3序列；所述B2探针为P4序列；所述C探针从5’端到3’端的碱基组成为：P5序列、M2、P6序列；所述D探针为P7序列；所述E探针从5’端到3’端的碱基组成为：5’端修饰有荧光基团的P8序列、3’端修饰有可猝灭荧光基团的结构。所述膀胱癌检测试剂盒具有杂交时间短、灵敏度高、特异性强、准确率高和操作步骤简单等优点。

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种膀胱癌检测试剂盒。

背景技术

膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，其中尿路上皮癌约占膀胱癌的90％，75％初诊患者为非浸润性膀胱癌。膀胱癌的术后复发率高达50％～70％，10％～15％复发性非浸润性膀胱癌会进展为浸润性癌或转移性癌(Kaufman D S et al.,Lancet,2009,374:239-249)。因此，膀胱癌早期诊断及预防肿瘤复发至关重要。目前，膀胱镜检查及细胞学形态检查是膀胱癌临床诊断普遍使用的两种手段。但是，膀胱镜属于侵入性检查，会给患者带来一定的痛苦，且不易发现早期肿瘤病变；尿脱落细胞学形态检查虽特异性高但灵敏度低。因此，如何无创的、准确的对膀胱癌做出早期诊断和复发预测，是当前迫切需要解决的问题。

研究表明，在膀胱癌的发生发展过程中，染色体或其片段发生了某些非随机性改变，染色体畸变是膀胱癌发生发展的根本原因，对膀胱癌细胞中的染色体异常进行检测，可以为膀胱癌的临床诊断与治疗提供有价值的依据(Baffa R et al.,Journal ofExperimentalClinical Cancer Research Cr,2006,25:145-60)。膀胱癌细胞中染色体异常的FISH检测，尤其是3、7、17号染色体数目的异常及p16基因缺失(该基因定位于染色体9p21)的FISH检测，在膀胱癌早期诊断与复发监测的应用中成为近年来研究的热点。膀胱癌的发生发展与3、7、17号染色体数目的异常及p16基因缺失有着重要关联。针对膀胱癌的FISH研究显示，3、7、17号染色体多倍体发生率为27％～76％，13％～76％、12％～47％，p16基因(染色体9p21)缺失率为28％～83％(Veeramachaneni R et al.,DiagnosticCytopathology,2010,28:301-307)。在2001年，美国食品和药物管理局(FDA)批准一种检测尿液中脱落细胞染色体3、7、17号数目和染色体9p21缺失情况的FISH诊断试剂盒——FISH膀胱癌诊断试剂盒，用于膀胱癌患者术后复查的监测，随后，在2005年又批准其用于在无膀胱癌病史的肉眼或镜下血尿患者中诊断膀胱癌。

文献报道，3、7、17号染色体数目的异常及9p21缺失的FISH检测在尿路上皮癌诊断方面的总体诊断性能尤其是灵敏度要优于尿脱落细胞学形态检查(Hajdinjak T.UrologicOncology-seminars and Original Investigations,2008,26:646-651)。3、7、17号染色体数目的异常及9p21缺失的FISH检测联合尿脱落细胞学形态检查可通过早期诊断膀胱癌从而降低膀胱癌发病率和死亡率(Veeramachaneni R et al.,Diagnostic Cytopathology,2010,28:301-307)。即上述基因异常的FISH检测在膀胱癌早期诊断、预后评估及复发监测中具有重要临床应用价值，已成为膀胱癌早期诊断及术后复发监测的无创的有效手段。