[发明专利]一种细胞冻存液及其冻存造血干细胞的方法和干细胞制剂

说明书

本发明涉及冻存液技术领域，尤其涉及一种细胞冻存液及其冻存造血干细胞的方法和干细胞制剂。本发明公开了一种细胞冻存液，由DMSO、人血白蛋白注射液和勃脉力A注射液组成。该细胞冻存液成分简单安全，各组分相互配合，具有协同效应，可以显著提升细胞的冻存效果，使冻存的造血干细胞复苏后活率较高，且细胞稳定性好，有利于疾病的治疗。

技术领域

本发明涉及冻存液技术领域，尤其涉及一种细胞冻存液及其冻存造血干细胞的方法和干细胞制剂。

背景技术

细胞冻存液可以防止细胞在冷冻过程中受损伤，传统的造血干细胞冻存液采用10％DMSO+90％胎牛血清冻存的造血干细胞，经复苏清洗后活率较低，凋亡细胞裂解物包裹未凋亡的细胞形成絮状物甚至细胞成团且细胞不稳定，成团的细胞输入到人体内后容易引起病人发热。因此，有效的控制造血干细胞冻存后的活率以及稳定性至关重要。

发明内容

本发明提供了一种细胞冻存液及其冻存造血干细胞的方法，解决了传统的造血干细胞冻存液冻存的造血干细胞经复苏后，细胞活率较低，细胞易成团的问题。

其具体技术方案如下：

本发明提供了一种细胞冻存液，由以下组分组成：

DMSO；

人血白蛋白注射液；

勃脉力A注射液。

本发明提供的细胞冻存液组成简单，细胞冻存液中各组分相互配合，具有协同效应，可以显著提升细胞的冻存效果，使冻存的造血干细胞复苏后活率较高，且细胞稳定性好。

本发明中DMSO为临床级DMSO。

本发明中，所述DMSO、所述人血白蛋白注射液和所述勃脉力A注射液的体积比为(1-2)：(4-6)：(2-5)。在各组分该配比范围内，更有利于提升细胞冻存液的冻存效果，体积比优选为1：5：4、1：4：5或2：6：2。

本发明中，所述人血白蛋白注射液中人血白蛋白的质量浓度为20％；

所述勃脉力A注射液为复方电解质溶液，其组分为：每1000ml勃脉力A注射液中含有氯化钠5.26g、葡萄糖酸钠5.02g、醋酸钠3.68g、氯化钾0.37g、氯化镁0.30g；

本发明还提供了上述细胞冻存液在冻存造血干细胞中的应用。

造血干细胞较间充质干细胞更脆弱，体外分离保存较难，且易成团，将上述细胞冻存液应用在造血干细胞的冻存中，可以提高冻存的造血干细胞复苏后的活率，从而减少或避免细胞成团的问题。

本发明还提供了一种冻存造血干细胞的方法，将造血干细胞冻存于所述细胞冻存液中。

所述冻存具体为：将所述造血干细胞加入所述细胞冻存液中，进行程序降温后，置于液氮中保存；

所述细胞冻存液为4℃预冷的细胞冻存液。

本发明还提供了一种干细胞制剂，包括造血干细胞和上述细胞冻存液。

本发明提供的干细胞制剂在冻存8h后，仍可保持较高的细胞活率，有利于该干细胞制剂对疾病的治疗。

本发明中，所述干细胞制剂还包括：勃脉力A注射液。所述勃脉力A注射液与所述细胞冻存液的体积比为1：1。

本发明中，所述干细胞制剂的制备具体为：采用勃脉力A注射液重悬造血干细胞，调整细胞密度(2-3)×10⁷个/ml，再以1：1的体积比加入细胞冻存液，得到干细胞制剂。本发明干细胞制剂制备好即可使用，也可以冻存后使用。