[发明专利]啤酒酵母菌提取物在制备对UVB损伤的人HSF和Hacat细胞的修复的护肤产品中的应用

说明书

本发明公开了啤酒酵母菌提取物对UVB损伤的人HSF和Hacat细胞的修复的应用，包括以下步骤：1）人的皮肤细胞HSF和Hacat紫外UVB损伤模型的建立：a）人正常皮肤细胞即HSF细胞和人永生化表皮角质细胞即Hacat细胞的培养；b)紫外线照射损伤HSF细胞和Hacat细胞：采用小剂量，即5mJ/cm²，多次照射，UVB总剂量40mJ/cm²时，得到损伤后的人的皮肤细胞；c)检测：显微镜下观察细胞形态，测定细胞相对存活率；2）用含有1%FBS的DMEM继续培养受损伤的HSF细胞和Hacat细胞，并加啤酒酵母菌提取物作用24h后，测相关皮肤活力指标SOD和MDA。啤酒酵母菌提取物对护肤和皮肤修复效果明显，且基本无毒，具备高稳定性和耐存储的特点，可以应用于防晒和修复晒伤护肤产品的开发。

技术领域

本发明涉及生物药品技术领域，具体的说是啤酒酵母菌提取物在制备对UVB损伤的人HSF和Hacat细胞的修复的护肤产品中的应用。

背景技术

紫外线是电磁波谱中波长100-400nm辐射的总称，根据波长紫外线分为长波UVA(315-400nm)、中波UVB(280-315nm)、短波UVC(100-280nm)。相比于UVA，UVB生物活性远高，所以UVB是光老化损伤的主要原因。UVB中约5%的辐射可以停留在皮肤表面，其中约20%可以穿透皮表面到达表皮层。而皮肤为抵抗各种环境压力提供有效屏障的基本功能，因此，防止皮肤由于紫外线照射而导致的损伤尤为重要，目前，市面上的防晒霜该功效，但是只能防护皮肤不被紫外线损伤，对皮肤快速恢复的效果不明显。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了啤酒酵母菌提取物新用途，即啤酒酵母菌提取物在制备对UVB损伤的人HSF和Hacat细胞的修复的护肤产品中的应用。

本发明是啤酒酵母菌提取物在制备对UVB损伤的人HSF和Hacat细胞的修复的护肤产品中的应用，包括以下步骤：1）人的皮肤细胞HSF和Hacat紫外UVB损伤模型的建立：a）人正常皮肤细胞HSF细胞和人永生化表皮角质细胞Hacat细胞的培养；

b)紫外线照射损伤HSF细胞和Hacat细胞：采用小剂量5mJ/cm²，多次照射，UVB总剂量40mJ/cm²时，得到损伤后的人的皮肤细胞；

c) 检测：显微镜下观察细胞形态，测定细胞相对存活率；

2）用含有1%FBS的DMEM继续培养受损伤的HSF细胞和Hacat细胞，并加啤酒酵母菌提取物作用24h后，测相关皮肤活力指标SOD和MDA。

本发明的进一步改进在于：步骤2）中加入的啤酒酵母菌提取物的浓度处于0.1uM~50uM范围内。

本发明的进一步改进在于：啤酒酵母菌提取物的浓度为10uM。

本发明的进一步改进在于：步骤1）中的a）步骤将HSF细胞和Hacat细胞分别种在6孔板中，用含10%FBS的DMEM培养基培养，待细胞铺板度达到60%~70%时，去掉培养基换含有1%FBS的DMEM培养12h。

本发明的进一步改进在于：在紫外线照射前，吸去培养液，将细胞覆盖薄薄一层PBS缓冲液，在紫外线照射后，吸去PBS缓冲液，换含有1%FBS的DMEM继续培养。

本发明的进一步改进在于：步骤1）中c）步骤采用台盼蓝染色和MTT测细胞存活率。

本发明的有益效果：本发明通过细胞层面构建皮肤损伤模型，不需要动物参与，节省成本和建模时间。细胞水平上对药物更加敏感，简化了材料浓度作用时间的筛选，为动物体内实验验证提供条件。啤酒酵母菌提取物对护肤和皮肤修复效果明显，且基本无毒，具备高稳定性和耐存储的特点，光损伤后的细胞加入啤酒酵母菌提取物浓度10uM时作用24h可以明显提升细胞的修复能力，可以应用于防晒和修复晒伤护肤产品的开发。

附图说明