[发明专利]鄞红葡萄磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶PEPCK基因、其扩增引物及应用在审

专利信息
申请号: 202011440273.X 申请日: 2020-12-11
公开(公告)号: CN112553228A 公开(公告)日: 2021-03-26
发明(设计)人: 王锦阳;吴月燕 申请(专利权)人: 浙江万里学院
主分类号: C12N15/60 分类号: C12N15/60;C12N9/88;C12N15/11;C12Q1/6851;C12Q1/6895;C12N15/82;A01H5/08;A01H6/88
代理公司: 宁波奥圣专利代理有限公司 33226 代理人: 谢潇
地址: 315100 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 葡萄 磷酸 烯醇式 丙酮酸 激酶 pepck 基因 扩增 引物 应用
【权利要求书】:

1.鄞红葡萄磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶PEPCK基因,其特征在于,该基因的编码区的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,全长氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.根据权利要求1所述的鄞红葡萄磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶PEPCK基因,其特征在于,该基因的编码区的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个碱基且具有磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶活性的基因序列。

3.根据权利要求2所述的鄞红葡萄磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶PEPCK基因,其特征在于,该基因的全长氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列列经取代、缺失和/或增加一个或多个氨基且具有磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶活性的由SEQ ID NO.2衍生的蛋白质。

4.用于扩增鄞红葡萄磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶PEPCK基因的引物,其特征在于,包括用于扩增SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列的引物组Kl-PERPCK-F和Kl-PEPCK-R,该引物组的序列为:

Kl-PERPCK-F:GTTTTGTTTCCCACTCAG;

Kl-PEPCK-R:TTATGAGGGTTTACTCTTGAACTTCC。

5.用于鄞红葡萄磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶PEPCK基因荧光定量RT-qPCR的引物,其特征在于,包括引物组YgPEPCK-F、ygPEPCK-R、N2-F和N2-R,其中N2-F和N2-R为内参基因引物,该引物组的序列为:

YgPEPCK-F:ACCTGTGAGCAAACTGAACC;

ygPEPCK-R:ATGTTGCTTGTGGCTCCTT;

N2-F:CAAGAGAAACCATCCCTAGCTG;

N2-R:TCAATCTGTCTAGGAAAGGAAG。

6.权利要求1所述的鄞红葡萄磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶PEPCK基因在调控鄞红葡萄果实糖酸含量中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,将权利要求1所述的鄞红葡萄磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶PEPCK基因转到鄞红葡萄细胞,再培育转化后的鄞红葡萄细胞。

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