[发明专利]一种生物素化出芽短梗酶多糖衍生物的制备方法

说明书

本发明公开了一种生物素化出芽短梗酶多糖衍生物的制备方法，包括以下步骤：反应——析出——均质——透析——洗涤——干燥。本方法制备的一种生物素化出芽短梗酶多糖衍生物可以适应高温热加工工序，可以使得衍生物用于更多的制备领域。

技术领域

本发明属于多糖衍生物的制备方法，尤其涉及一种生物素化出芽短梗酶多糖衍生物的制备方法。

背景技术

生物素为B族维生素之一，又称维生素H、维生素B7，是合成维生素C的必要物质。多糖(polysaccharide)是由糖苷键结合的糖链，至少要超过10个的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物，可用通式(C6H10O5)n表示。由相同的单糖组成的多糖称为同多糖，如淀粉、纤维素和糖原；以不同的单糖组成的多糖称为杂多糖，如阿拉伯胶是由戊糖和半乳糖等组成。多糖不是一种纯粹的化学物质，而是聚合程度不同的物质的混合物。多糖类一般不溶于水，无甜味，不能形成结晶，无还原性和变旋现象。多糖也是糖苷，所以可以水解，在水解过程中，往往产生一系列的中间产物，最终完全水解得到单糖。如何使多糖生物素话应用于更多领域，是需要解决的问题。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明公开一种生物素化出芽短梗酶多糖衍生物的制备方法，包括以下步骤：

(1)在锥形瓶中一次加入无水二甲基亚砜、生物素、N,N’-二环已基碳酰亚胺和4-二甲基氨基吡啶，室温下反应0.5-1h，然后加入出芽短梗酶多糖，继续在室温下反应1-2h，直至白色浑浊物析出，得到浑浊溶液；

(2)过滤步骤1中得到的浑浊溶液，进行一次均质得到溶液1，静置3-5h 后，出去表面杂质及上层溶液，得到溶液1；

(3)将溶液1的白色浑浊物过滤除去，收集滤液放入截留分子量为9000Da 的透析袋中，加入去离子水透析4-8d，每隔1h更换一次去离子水，透析结束后，抽滤得到白色沉淀，依次用二氯甲烷和去离子水洗涤白色沉淀，干燥，得到生物素化出芽短梗酶多糖衍生物。

更进一步的，步骤1中，无水二甲基亚砜、生物素、N,N’-二环已基碳酰亚胺和4-二甲基氨基吡啶的摩尔比为158:10:20:1。

更进一步的，步骤1中，生物素与出芽短梗酶多糖的摩尔比为35:21。

本发明的有益效果是：本方法制备的一种生物素化出芽短梗酶多糖衍生物可以适应高温热加工工序，可以使得衍生物用于更多的制备领域。

具体实施方式

为详细说明本发明的技术内容、构造特征、所实现目的及效果，以下结合实施方式详予说明。

一种生物素化出芽短梗酶多糖衍生物的制备方法，包括以下步骤：

(1)在锥形瓶中一次加入无水二甲基亚砜、生物素、N,N’-二环已基碳酰亚胺和4-二甲基氨基吡啶，室温下反应0.5-1h，然后加入出芽短梗酶多糖，继续在室温下反应1-2h，直至白色浑浊物析出，得到浑浊溶液；

(2)过滤步骤1中得到的浑浊溶液，进行一次均质得到溶液1，静置3-5h 后，出去表面杂质及上层溶液，得到溶液1；

(3)将溶液1的白色浑浊物过滤除去，收集滤液放入截留分子量为9000Da 的透析袋中，加入去离子水透析4-8d，每隔1h更换一次去离子水，透析结束后，抽滤得到白色沉淀，依次用二氯甲烷和去离子水洗涤白色沉淀，干燥，得到生物素化出芽短梗酶多糖衍生物。步骤1中，无水二甲基亚砜、生物素、N,N’- 二环已基碳酰亚胺和4-二甲基氨基吡啶的摩尔比为158:10:20:1。步骤1中，生物素与出芽短梗酶多糖的摩尔比为35:21。

实施例1

一种生物素化出芽短梗酶多糖衍生物的制备方法，包括以下步骤：