[发明专利]生物催化制备(1R,2R)-2-羟基环戊腈的方法

权利要求书

1.一种生物催化制备(1R,2R)-2-羟基环戊腈的方法，其特征在于，在液相反应体系中，以2-羰基环戊腈为底物，在氢源和辅酶存在的条件下，通过酮还原酶催化羰基还原制备得到(1R,2R)-2-羟基环戊腈；

所述酮还原酶选自以下组：

1)来自Lactobacillus kefiri的酮还原酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；

2)来自Rhodococcus sp.WB1的酮还原酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;

酮还原酶催化反应的pH为6.2～7.5。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，酮还原酶的添加量为每g底物添加0.1～10g酮还原酶。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，酮还原酶的添加量为每g底物添加1～5g酮还原酶。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，酮还原酶的添加量为每g底物添加2～3g酮还原酶。

5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，酮还原酶的添加量为每g底物添加2.5g酮还原酶。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述氢源选自异丙醇、葡萄糖中的至少一种。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述氢源为葡萄糖，且额外加入葡萄糖脱氢酶组合使用。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，氢源的添加量为每g底物添加0.5～50g氢源；或还额外添加0.01～1g葡萄糖脱氢酶。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述辅酶为选自NAD、NADH、NADP或NADPH的任意一种或多种。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述辅酶为NADP或NAD。

11.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述辅酶的添加量为每g底物添加0.01～1.0g辅酶。

12.如权利要求1所述的方法，其特征在于，酮还原酶催化反应的反应温度为15～60℃。

13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，酮还原酶催化反应的反应温度为20～40℃。

14.如权利要求13所述的方法，其特征在于，酮还原酶催化反应的反应温度为25～35℃。

15.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的反应体系的反应溶剂为水或缓冲盐水溶液。

16.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述缓冲盐水溶液为KH₂PO₄-K₂HPO₄缓冲液或NaH₂PO₄-Na₂HPO₄缓冲液。

17.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的反应体系还含有助溶剂。

18.如权利要求17所述的方法，其特征在于，所述助溶剂为有机溶剂，所述助溶剂选自下组：N,N-二甲基甲酰胺，二甲基亚砜，甲醇，乙醇，异丙醇，丙酮，或其组合。

19.如权利要求18所述的方法，其特征在于，所述助溶剂选自N,N-二甲基甲酰胺或二甲基亚砜。

20.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括分离出(1R,2R)-2-羟基环戊腈的步骤。