[发明专利]一种烟酸及烟酰胺生物传感系统有效

专利信息
申请号: 202011446330.5 申请日: 2020-12-09
公开(公告)号: CN112501193B 公开(公告)日: 2022-09-27
发明(设计)人: 周哲敏;韩来闯;崔文璟;程中一;刘中美;周丽;郭军玲 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12N15/70 分类号: C12N15/70;C12N15/65;C12N15/55;C12N15/60;C12N1/21;C12Q1/02;C12Q1/34;C12Q1/527;C12Q1/6897;C12R1/19
代理公司: 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 代理人: 仇钰莹
地址: 214000 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 烟酸 烟酰胺 生物 传感 系统
【权利要求书】:

1.一种响应烟酸的生物传感系统,其特征在于,包括PlacI启动子、NadR 蛋白、PnadB启动子;所述NadR 蛋白的编码基因位于PlacI启动子下游,使PlacI启动子调控NadR 蛋白的表达;所述PlacI启动子和PnadB启动子的转录方向相反;所述PnadB 启动子上具有可以结合NadR 蛋白和烟酸的结合物的结合位点;编码所述NadR 蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.6 所示;所述PnadB启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.2 所示。

2.根据权利要求1 所述的生物传感系统,其特征在于,所述PnadB启动子的下游具有标记物基因。

3.根据权利要求2 所述的生物传感系统,其特征在于,所述标记物基因为绿色荧光蛋白基因。

4.根据权利要求2或3所述的生物传感系统,其特征在于,所述标记物基因的下游还含有P3启动子和PncA 基因;所述P3启动子调控PncA 基因的表达;所述PncA基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示。

5.根据权利要求4 所述的生物传感系统,其特征在于,所述PlacI 启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.5 所示。

6.含有权利要求1~5 任一所述生物传感系统的重组大肠杆菌JM109。

7.一种制备权利要求6所述重组大肠杆菌的方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)将PlacI启动子、NadR 蛋白、PnadB启动子与载体连接,得到含有响应烟酸的蛋白表达调控元件的质粒;(2)将外源基因连接至PnadB启动子的下游,得到响应烟酸的质粒外源基因;(3)将质粒外源基因转化到大肠杆菌JM109细胞中;

编码所述NadR 蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.6 所示;所述PnadB启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.2 所示。

8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述外源基因为标记物基因。

9.权利要求2~5 任一所述的生物传感系统在制备检测烟酸的试剂中的应用。

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