[发明专利]一株副地衣芽孢杆菌及其应用

说明书

本发明提供一株副地衣芽孢杆菌Bacillus paralicheniformis ZYGT1811，其保藏编号为CCTCC M 2020759。本发明的生防细菌ZYGT1811能够显著抑制甘蓝枯萎病病原菌生长，使病原菌菌丝出现膨大变形及分支节间缩短现象。该菌株可产生淀粉酶、蛋白酶、果胶酶、β‑1,3‑葡聚糖酶、铁载体、NH₃及IAA，具有固氮作用，不具有解磷解钾能力。该菌株对常见植物病原菌(立枯丝核菌、核盘菌、辣椒疫霉菌、串珠镰刀菌、茄病镰刀菌和禾谷镰刀菌)均有抑制效果，具有一定的广谱活性。该菌株对甘蓝枯萎病的防效为57.73％，与对照的防效相比差异显著。

技术领域

本发明属于植物枯萎病生物防治技术领域，具体涉及一株副地衣芽孢杆菌及其应用，尤其是在制备防治甘蓝枯萎病的菌剂或药物中的应用。

背景技术

甘蓝枯萎病是一种由尖孢镰刀菌引起的典型土传性病害，可在土壤中保留数年甚至数十年，严重影响甘蓝品质和产量。近年来，此病在我国各甘蓝种植区均有发生，随着种植面积增加和种植年限的延长，此病日趋严重。此病的化学防治尚未发现特效药剂，目前主要依赖于常见的杀菌剂，如福美双、代森锰锌、多菌灵等，但其防效并不十分理想。而生产中为追求防治效果，获得更大的经济利益，化学药剂滥用、超剂量使用等现象时有发生，易加重土壤中农药残留、诱导病原菌抗药性，对食品安全和环境安全产生严重的负面影响。物理防治如蒸汽消毒、热水消毒、太阳能消毒等方法费时费力且成本较高，在实际生产中不适用。选用抗病品种是防治此病最为经济和有效的手段，但优良的抗病品种的选育周期较长，目前我国筛选出来的抗枯萎病的优良品种相对较少。近年来，农业生产中化学物质减量增效技术被大力提倡，发展绿色友好的可持续农业越来越受到重视。

生物防治在一定程度上可补充甚至替代化学防治，达到化学物质减量的作用，是目前极具研究价值的绿色防治方法。有益的植物、微生物相互作用是决定植物健康和土壤肥力的重要因素，生防菌的有益作用在各种重要的农作物生产中已得到证实。生防菌通过各种机制不仅可以抑制病原菌生长，还可诱导植物激素的产生，并增加与植物防御有关的过氧化物酶、多酚氧化酶和超氧化物歧化酶等的水平，由此增强植株对病害的系统抗性。芽孢杆菌属是当前被广泛研究的一类生防菌，其许多菌株不仅对多种植物病原体均有较好的拮抗活性，且具有显著的合成大量有益物质的能力。芽孢杆菌的作用机制较为复杂，已证实的有效机制主要有吲哚乙酸的产生、磷酸盐溶解、非共生固氮、HCN的产生、铁载体、水解酶和抗生素的产生，目前使用的一些高效芽孢杆菌菌株通常具有以上描述的多个特性。

副地衣芽孢杆菌是芽孢杆菌属的革兰氏阳性细菌，菌体呈杆状，其基因组中具有多个编码蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶、半纤维素酶和参与氮代谢、负责固氮调节的基因。研究表明其分泌胞外产物的活性较强，具有抑制植物病原菌、固氮作用和促进植物生长的能力。因此，副地衣芽孢杆菌是一种极具研究价值的细菌。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供了一株副地衣芽孢杆菌及其在防治甘蓝枯萎病中的应用。该菌株在与甘蓝枯萎病菌Fusarium oxysporum的平板对峙试验中，表现出明显的拮抗作用，且可促进甘蓝植株生长。

本发明提供一株副地衣芽孢杆菌Bacillus paralicheniformis ZYGT1811，分离自甘肃省张掖市高台县的盐渍土壤，于2020年11月18日保存至中国典型培养物保藏中心，保藏地址：湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内)，保藏编号为CCTCC M2020759。

本发明还提供副地衣芽孢杆菌Bacillus paralicheniformis ZYGT1811菌液，将上述的副地衣芽孢杆菌Bacillus paralicheniformis ZYGT1811 CCTCC M 2020759用LB固体培养基活化，然后于28℃，用LB液体培养基振荡培养得种子液，将种子液接种于发酵培养基中，于28℃下摇床培养，得副地衣芽孢杆菌Bacillus paralicheniformis ZYGT1811菌液。

作为优选，所述发酵培养基配方为：