[发明专利]一种感染与非感染恶性肿瘤诊治的新型靶标及其干预应用

说明书

本发明属于生物医学技术领域，涉及肿瘤标志物的开发和应用，具体涉及YY1的酸响应序列作为肿瘤标志物的检测方法和评价标准以及YY1蛋白存在酸响应序列及其在抗肿瘤靶向药物开发中的潜在干预应用。本发明公开了一种多肽，包括YY1氨基酸第70‑80位的MH区域。本发明还涉及该多肽的应用、相应的多肽识别试剂和试剂盒。的YY1酸响应序列可作为肿瘤分级和预后检测分子标志物，其靶向抑制剂用于抗肿瘤治疗中的潜在应用。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，涉及肿瘤标志物的开发和应用，具体涉及YY1的酸响应序列作为肿瘤标志物的检测方法和评价标准以及YY1蛋白存在酸响应序列及其在抗肿瘤靶向药物开发中的潜在干预应用。

背景技术

YY1(YinYang1，NF-E1,UCRBP或CF1)是1991年由施阳教授发现[1,2]，是一个高度保守的锌指转录因子[3-5]，属于人类GLI-Kruppel蛋白家族[2]，参与转录激活、转录 抑制、转录启始和染色质修饰。YY1在哺乳动物细胞和组织中广泛表达，在约10％的人类 基因和重复序列中发现其结合位点[6]。人类YY1cDNA的开放阅读框编码414个氨基酸的 蛋白质，其分子量为44kDa。然而，可能是由于YY1蛋白质结构的原因，其在SDS凝胶上 分子量大小是65-68kDa。YY1的C端是非常保守的锌指结构域，与序列特异性的DNA结 合，发挥激活或抑制功能。靠近N端的氨基酸43-53区域是由连续11个酸性氨基酸组成 的，氨基酸70-80区域由连续11个组氨酸组成，均位于YY1的激活结构域；YY1中间氨 基酸154-201区域有很高比例的甘氨酸和丙氨酸残基，位于YY1的抑制域。因此，在YY1 中有两个抑制域，一个与锌指结构域，另一个是富含甘氨酸的氨基酸154-226区域[7]。 YY1参与调控细胞分化、胚胎发育和肿瘤发生等多种生物学过程[8-13]，可调控多种致瘤 性病毒的生活周期，调控肿瘤发生发展，YY1抑制HPV基因组E6和E7基因的转录，抑制 EBV和KSHV裂解复制开关基因的激活，因而在致癌性人乳头瘤病毒 (Humanpapillomavirus,HPV)[14-16]、EB病毒(Epstein-Barrvirus，EBV)[17-20]、 卡波氏肉瘤病毒(KSHV)[21-23]相肿瘤中YY1可能发挥抑制肿瘤进展的作用。很多研究 结果表明YY1可通过多种机制促进HBV相关肝癌[24-27]，肝细胞癌[28-32]、结直肠癌 [33-40]、胶质瘤[41-43]、肺癌[44-46]、神经母细胞瘤[47]、和Wilms肿瘤[48]的发展， 与患者的不良预后呈正相关；可抑制食管鳞状细胞癌的发展[49]；但在鼻咽癌[50,51]和 乳腺癌[52-54]中的促癌或抑癌作用存在争议，有待进一步研究。许多研究数据亦显示YY1 表达水平与肿瘤分级和预后密切相关，已成为潜在的肿瘤预后评价指标和治疗靶点。

肿瘤微环境(Tumormicroenvironment,TME)是一个由肿瘤细胞及其周围的成纤维细 胞、免疫细胞、周细胞、脂肪细胞、内皮细胞、神经元细胞及细胞外基质组成的复杂的 动态系统[55]。正常细胞的胞外环境是pH为7.4的中性环境，而肿瘤细胞特别是实体瘤 由于发生“Warburg效应”导致酸的产生，特别是乳酸和二氧化碳的产生，导致肿瘤微环 境的酸化。在物理pH值下，乳酸99％以上解离成乳酸根阴离子和氢离子(H+)。乳酸脱氢 酶是一类依赖NAD+的酶，活化状态的LDH是一种同(或异)四聚体分子，由两种不同的 亚基组成：乳酸脱氢酶A(LDHA)和乳酸脱氢酶B(LDHB)。LDHA和LDHB在肿瘤细胞代谢中 发挥调节丙酮酸和乳酸的双向转化的作用，LDHA对丙酮酸有较高的亲和力，在厌氧条件 下优先将丙酮酸转化为乳酸，将NADH转化为NAD(+)，而LDHB对乳酸有较高的亲和力， 在氧充足时优先将乳酸转化为丙酮酸，将NAD(+)转化为NADH[56]。