[发明专利]一种生产丝裂霉素的新方法

说明书

本发明公开了一种生产丝裂霉素的新方法，包括以下步骤：S1、丝裂霉素发酵液预处理；S2、板框过滤：将料液压入板框中的丙纶滤布进行过滤，并收集滤液；S3、过滤；S4、提取步骤：将步骤S3中的滤液经过大孔树脂进行第一次吸附、第一次洗脱，得到第一次洗脱液；将第一次洗脱液进行萃取，得到萃取液；将萃取液经过大孔树脂进行第二次吸附、第二次洗脱，得到第二次洗脱液；将第二次洗脱液经工业色谱进行纯化，得到料液；将料液经过大孔树脂进行第三次吸附、第三次洗脱，得到第三次洗脱液；S5、精制步骤。本发明是在现有技术的基础上优化了MMC的提取纯化生产过程，增加了部分分离纯化工艺步骤，使整个分离纯化的过程更为稳定可控。

技术领域

本发明涉及药物提取纯化领域，特别涉及一种生产丝裂霉素的新方法。

背景技术

MMC是发酵培养，通过提取纯化所得到的抗肿瘤药物，其化学结构式如下所示：

本品为微生物(Streptomyces，caespitosus)发酵培养产生的代谢产物经分离提纯而得，属于醌类抗生物质，其分子结构上具有三个作用于细胞的活性基团，共同参与肿瘤细胞的代谢，为一烷化剂，具有细胞毒副作用。本品可与DNA发生交叉连接，并可使DNA解聚，阻止DNA的复制过程，从而抑制癌细胞分裂，因此它比一般的烷化剂作用大，毒性与一般烷化剂相似，但以用量算则远比其它类烷化剂有效。

由于为发酵液进行提取，料液中杂质料多，成产周期长，生产过程受发酵情况影响较大，有必要优化提取纯化工艺，稳定整个生产过程，生产出合格的MMC产品。

发明内容

本发明的目的是提供一种生产丝裂霉素的新方法，解决上述现有技术问题中的一个或者多个。

本发明提供的一种生产丝裂霉素的新方法，包括以下步骤：

S1、丝裂霉素发酵液预处理：将丝裂霉素发酵液转移至预处理罐，对发酵液进行搅拌并同时加入珍珠岩，再用1％质量浓度的氢氧化钠溶液调节料液pH；

S2、板框过滤：将料液压入板框中的丙纶滤布进行过滤，并收集滤液；

S3、过滤：将滤液用袋式过滤器进行过滤，从而除去滤液中的颗粒杂质；

S4、提取步骤：将步骤S3中的滤液经过大孔树脂进行第一次吸附、第一次洗脱，得到第一次洗脱液；将第一次洗脱液进行萃取，得到萃取液；将萃取液经过大孔树脂进行第二次吸附、第二次洗脱，得到第二次洗脱液；将第二次洗脱液经工业色谱进行纯化，得到料液；将料液经过大孔树脂进行第三次吸附、第三次洗脱，得到第三次洗脱液；

S5、精制步骤：将第三次洗脱液经过浓缩、结晶、过滤、洗涤、干燥、粉碎，从而得到所述丝裂霉素。

在某些实施方式中，步骤S1中，丝裂霉素发酵液与珍珠岩的重量比为100:2至100:4。

在某些实施方式中，步骤S1中调节料液pH的范围为7至9。

在某些实施方式中，步骤S4具体包括如下步骤：

将步骤S3中的滤液经过大孔树脂进行第一次吸附，第一次吸附完成后，用去离子水冲洗树脂至洗涤液颜色低于Y3#色，洗涤结束后进行空压吹干，然后通入乙酸乙酯进行第一次洗脱，并使用磷酸缓冲液调节pH为7至8，收集第一次洗脱液至颜色低于Y5#色后停止洗脱；

通过氯化钠缓冲液对第一次洗脱液进行萃取，得到萃取液；

将萃取液经过大孔树脂进行第二次吸附，然后使用5至30％质量浓度的甲醇水溶液进行二次洗脱，得到二次洗脱液；

将二次洗脱液经过工业色谱上柱、水洗、10％质量浓度甲醇洗涤、20至25％质量浓度甲醇进行纯化，从而得到料液；