[发明专利]一种崇左秋海棠组培繁殖方法

说明书

本发明适用于秋海棠属植物繁殖技术领域，公开了一种崇左秋海棠组培繁殖方法，包括以下步骤：外植体选取、初代培养、继代培养、生根培养和生根苗移植，其中，初代培养中的诱导培养基包括MS基本培养基、0.8‑1.5mg/L6‑BA、0.05‑0.1mg/L NAA、0.05‑0.1mg/L IBA、30g/L蔗糖、5.0‑6.0g/L琼脂，诱导培养基的pH为5.5‑5.8；继代培养的培养基包括MS基本培养基、0.2‑0.6mg/L 6‑BA、0.05‑0.1mg/L NAA、0.05‑0.1mg/L IBA、30g/L蔗糖、5.0‑6.0g/L琼脂，继代培养基的pH为5.5‑5.8；生根培养的培养基包括1/2MS基本培养基、0.5‑1.5mg/L IBA、30g/L蔗糖、5.0‑6.0g/L琼脂，生根培养基的pH为5.5‑5.8。本发明所提供的崇左秋海棠组培繁殖方法，采用叶柄作为外植体进行组织培养，其诱导率高，增殖系数大，从而实现对崇左秋海棠的快速增殖，为崇左秋海棠的保育和繁殖提供保障。

技术领域

本发明属于秋海棠属植物繁殖技术领域，尤其涉及一种崇左秋海棠组培繁殖方法。

背景技术

崇左秋海棠(Begonia chongzuoensis)为秋海棠科(Begoniaceae)秋海棠属植物。目前为止，仅在广西西部一个喀斯特地貌石灰岩山体中发现有分布，在现有资料中，仍缺乏其详细的种群相关数据。秋海棠属植物叶斑丰富，崇左秋海棠叶片具有绿色金属光泽，不同深浅的绿色斑纹，具有较高的观赏价值。该物种为广西特有，由于自然分布狭窄以及特殊的分布特点，生境十分脆弱，亟需开展该种的保护和繁育工作。

发明内容

本发明旨在至少解决上述技术问题之一，提供了一种崇左秋海棠组培繁殖方法，采用叶柄作为外植体进行组织培养，其诱导率高，增殖系数大，从而实现对崇左秋海棠的快速增殖，为崇左秋海棠的保育和繁殖提供保障。

本发明的技术方案是：一种崇左秋海棠组培繁殖方法，包括以下步骤：

外植体选取：选取生长状况良好的叶柄，对叶柄进行冲洗、消毒处理、清洗和切段后，得到外植体；

初代培养：将外植体接种于诱导培养基中，初代培养得到不定芽，所述诱导培养基包括MS基本培养基、0.8-1.5mg/L 6-BA、0.05-0.1mg/L NAA、0.05-0.1mg/L IBA、30g/L蔗糖、5.0-6.0g/L琼脂，且所述诱导培养基的pH为5.5-5.8；

继代培养：将不定芽接种于继代培养基中，增殖培养得到增殖芽，所述继代培养基包括MS基本培养基、0.2-0.6mg/L 6-BA、0.05-0.1mg/L NAA、0.05-0.1mg/L IBA、30g/L蔗糖、5.0-6.0g/L琼脂，且所述继代培养基的pH为5.5-5.8；

生根培养：将增殖芽接种于生根培养基中，生根培养得到生根苗，所述生根培养基包括1/2MS基本培养基、0.5-1.5mg/L IBA、30g/L蔗糖、5.0-6.0g/L琼脂，所述生根培养基的pH为5.5-5.8；

生根苗移植：将生根苗进行炼苗、移栽，获得崇左秋海棠栽培幼苗。

可选地，所述外植体选取的过程为：选取生长状况良好的叶柄，用清水冲洗15-25min，然后将叶柄于吐温-80水溶液冲洗，接着用次氯酸钠消毒5-7min，最后用无菌水清洗3-5次，切成0.6-1.0cm的小段后晾干。

可选地，选取生长状况良好的叶柄，用清水冲洗20min，然后将叶柄于0.1％的吐温-80水溶液冲洗，接着用次氯酸钠消毒7min，最后用无菌水清洗5次，切成1.0cm的小段后晾干。

可选地，所述初代培养的条件为：将外植体接种于诱导培养基中，置于黑暗条件下培养7-14天，然后置于光照强度为800-1200lx、光照时间为14-16小时/天、温度为24±2℃的条件下培养。