[发明专利]SARS-CoV-2胃肠炎症动物模型的构建方法

说明书

本发明属于动物模型构建技术领域，公开了SARS‑CoV‑2引起的胃肠炎症动物模型的构建方法，是在模拟病毒感染之前，先对胃肠道上皮进行酸灌肠处理，添加的乙酸能够造成一个轻微的损伤，在进行酸灌肠处理后，再腹腔注射SARS‑CoV‑2 Spike Protein更有利于模拟小鼠病毒性胃肠道症状的重现；经过这种方式获得的动物模型与现有技术报道的有关COVID‑19患者的临床症状一致，因此本发明方法构建的动物模型可以复制临床COVID‑19患者的胃肠道表现。

技术领域

本发明涉及动物模型构建技术领域，更具体地，涉及SARS-CoV-2胃肠炎症动物模型的 构建方法。

背景技术

2019冠状病毒病(COVID-19)，由SARS-CoV-2引起严重急性呼吸系统疾病，自2019年12月爆发以来已经引起全世界范围内的大流行。典型的呼吸道症状已被确认为 SARS-CoV-2感染的共同特征，气道被确认为靶器官。然而，自从我们课题组提供第一个胃 肠道的证据，且随着SARS-CoV-2感染研究深入，有胃肠道症状的病例的临床报告不断升级， 这些症状通常表现为腹泻、厌食、恶心和呕吐。此外，无法解释的是，一些感染SARS-CoV-2 的患者在发病时甚至在病程中仅表现出消化系统症状，说明胃肠道对SARS-CoV-2的高度易 感性。病理上，腹部CT显示肠壁增厚。值得注意的是，在ICU患者中能观察到小肠壁增厚。 然而，COVID-19患者胃肠道易感部位的系统特征以及胃肠道症状发生的机制尚不清楚，部 分原因是缺乏专为SARS-CoV-2胃肠道感染设计的动物模型。

截止2020年11月为止，新型冠状病毒肺炎疫情仍在国外，尤其是美国大肆流行，世界 各国对于抗新型冠状病毒肺炎的疫苗、抗体、药物研究迅速推展开来，动物模型在上述研究 中具有重要作用，甚至可能成为限制这些研究进展的主要因素，现有技术急需SARS-CoV-2 胃肠道感染的动物模型的构建。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术存在的上述缺陷，提供SARS-CoV-2胃肠炎 症动物模型的构建方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

SARS-CoV-2引起的胃肠炎症动物模型的构建方法，包括以下步骤：

S1、小鼠禁食16～24h后进行麻醉；

S2、从小鼠肛门注入乙酸，倒立小鼠，并对小鼠进行灌洗；

S3、一段时间后小鼠腹腔注射SARS-CoV-2 Spike Protein；

S4、数小时后即成功得到由SARS-CoV-2引起的胃肠炎症动物模型。

现有技术有一些关于新型冠状病毒SARS-CoV-2的肺部感染动物模型，本发明在发现 SARS-CoV-2 Spike蛋白可能引起胃肠道水肿和炎症的前提下，旨在构建SARS-CoV-2引起的 胃肠道炎症的动物模型，本发明研究发现，仅仅是用SARS-CoV-2 Spike Protein刺激只会引起 胃肠道的轻度炎症，无法与人类所表现出的胃肠道炎症一致，为了模拟人类的感染途径，本 发明在用腹腔注射SARS-CoV-2 Spike Protein之前，先对胃肠道上皮进行酸灌肠处理，添加的 乙酸能够造成一个轻微的损伤，在进行酸灌肠处理后，再用SARS-CoV-2Spike Protein刺激则 更有利于SARS-CoV-2 Spike Protein的结合；经过这种方式获得的动物模型与现有技术报道的 有关COVID-19患者的临床症状一致，因此本发明方法构建的动物模型可以复制临床 COVID-19患者的胃肠道表现。

前期对乙酸的浓度进行了考察，当选用5％的乙酸时，会造成严重的炎症和胃肠道损伤， 不符合COVID-19患者的胃肠道表现，优选地，上述动物模型的构建方法中，步骤S2乙酸的 浓度为1～2％，体积为500μL～1000μL。

优选地，上述动物模型的构建方法中，步骤S2以到达结肠位置开始注入乙酸。