[发明专利]微流控芯片和温敏材料复合系统及其制备方法和应用

权利要求书

1.微流控芯片和温敏材料复合系统，其特征在于，所述系统以鱼骨形微流控芯片为骨架，并对芯片内部进行改造，改造后的微流控芯片内部负载有温敏材料，所述系统以细胞骨架相关蛋白4作为检测指标；所述温敏材料为表面包被生物素-FITC和链霉亲和素的聚苯乙烯；所述复合系统由以下方法制得：

S1、将明胶溶液采用sulfo-NHS-Biotin功能化，并将溶液pH调至7.4，37℃下反应；反应结束后置于蒸馏水中透析，然后制成冻干粉；

S2、在聚苯乙烯表面包被生物素-FITC和链霉亲和素，制成纳米粒；

S3、采用S1的明胶冻干粉对微流控芯片内部进行改造；

S4、将S2制得的聚苯乙烯纳米粒注入改造后的微流控芯片内；

S5、将细胞骨架相关蛋白4抗体注入S4所得的微流控芯片内，待抗体与芯片内表面结合后用PBS缓冲液洗去未结合抗体，即制得微流控芯片和温敏材料复合系统；

其中，S3中的改造步骤如下：

（1）采用血浆对微流控芯片内部进行活化，然后将明胶-生物素溶液注入活化后微流控芯片内，静置反应，然后用PBS缓冲液冲洗干净；

（2）将链霉亲和素溶液注入步骤（1）处理后的微流控芯片内，静置孵育；

（3）重复以上步骤至少4次，以在微流控芯片内部形成多层明胶包被。

2.根据权利要求1所述的微流控芯片和温敏材料复合系统，其特征在于，S1中置于蒸馏水中透析48 h以上，且每隔12 h更换一次蒸馏水。

3.根据权利要求1所述的微流控芯片和温敏材料复合系统，其特征在于，明胶-生物素溶液的质量浓度w/v为1%，链霉亲和素的质量浓度为100 μg/mL。

4.根据权利要求1所述的微流控芯片和温敏材料复合系统，其特征在于，S5中细胞骨架相关蛋白4抗体的质量浓度为20 μg/mL。

5.权利要求1所述微流控芯片和温敏材料复合系统在制备捕捉血液中肺癌循环肿瘤细胞的试剂盒中的应用。

6.权利要求1所述微流控芯片和温敏材料复合系统在制备分离血液中肺癌循环肿瘤细胞的试剂盒中的应用。

7.权利要求1所述微流控芯片和温敏材料复合系统在制备分析血液中肺癌循环肿瘤细胞的试剂盒中的应用。