[发明专利]一种高纯度蜕皮激素的分离纯化方法

说明书

本发明涉及植物有效成分分离纯化技术领域，且公开了一种高纯度蜕皮激素的分离纯化方法，其具体分离纯化包括如下步骤：选料：选取1‑2年生的，无腐烂、无霉变、无肉眼可见杂质的露水草，取其露水草根进行清洗、晾干、去皮、烘干，得到露水草干根作为原料；搅碎：将原料置放进搅碎机中进行搅碎，然后过60目筛，得到露水草粉末；提取分离：将露水草粉末置入高效液相色谱仪中进行分离，并加入诱导剂，提取得到蜕皮激素样品，纯化：利用澄清剂对蜕皮激素样品进行吸附，得到高纯度蜕皮激素；本发明采用CH3COOC2H5诱导剂和一种磁性纳米粒子澄清剂，可以提高大幅提升提高蜕皮激素的回收率和纯度，而且本发明成本较低，有利于蜕皮激素进行大规模生产。

技术领域

本发明涉及植物有效成分分离纯化技术领域，具体为一种高纯度蜕皮激素的分离纯化方法。

背景技术

中国发明专利CN103788162A公开了一种从菠菜中提取蜕皮激素的方法，取菠菜叶片，在液氮中研磨成粉末，加入体积比9∶1MeOH-CHCl3混合液或100％MeOH溶液至 50ml，在37°C下震荡2小时，过滤，萃取两次，收集MeOH层，减压干燥，再用异丙醇重新溶解样品，过滤后即可进行高效液相色谱分析，测定其含量。但是此方法仅仅局限于实验室小型生产，且对菠菜原料的新鲜程度有限制，在非菠菜大面积上市的季节，不能满足生产要求；目前有的厂家从筋骨草中、露水草中、水竹中、水龙骨等提取蜕皮激素的，鲜有从菠菜中提取蜕皮激素；蜕皮激素，是从鸭跖草科植物珍珠露水草根部提取得到的一种活性物质，是一种内源甾醇类化物，根据纯度不同分为白色、灰白色、淡黄色或淡棕色结晶性粉末，广泛用于养殖、保健、化妆品、医药行业；但现如今市面上的蜕皮激素产品中，蜕皮激素的纯度不够，容易造负面效果，因此发明出一种高纯度蜕皮激素的分离纯化方法尤为重要。

现如今的蜕皮激素的分离纯化方法，大多采用大孔树脂柱分离纯化蜕皮激素，成本加高且工艺复杂，而且所得到的蜕皮激素的处厚度不高，无法进行一次性大规模的分离纯化，为此，我们提出一种高纯度蜕皮激素的分离纯化方法。

发明内容

为了克服上述的技术问题，本发明提供一种高纯度蜕皮激素的分离纯化方法。

本发明所要解决的技术问题：

（1）如何提高蜕皮激素的回收率；

（2）如何提高蜕皮激素的纯度。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种高纯度蜕皮激素的分离纯化方法，其具体分离纯化包括如下步骤：

（1）选料：选取1-2年生的，无腐烂、无霉变、无肉眼可见杂质的露水草，取其露水草根进行清洗、晾干、去皮、烘干，得到露水草干根作为原料；

（2）搅碎：将步骤（1）中的原料置放进搅碎机中进行搅碎，然后过60目筛，得到露水草粉末；

（3）提取分离：将露水草粉末置入高效液相色谱仪中进行分离，并加入诱导剂，提取得到蜕皮激素样品；

（4）纯化：利用澄清剂对蜕皮激素样品进行吸附，得到高纯度蜕皮激素。

进一步地，所述露水草干根为10-20份，诱导剂为50-60份，澄清剂为10-15份；所述诱导剂具体为CH3COOC2H5；所述露水草根进行清洗，需要将露水草根与蒸馏水放入超声波清洗器中清洗，其中蒸馏水的温度为8-12℃；所述露水草根烘干分为一次烘干和二次烘干，其一次烘干温度应控制在15-35℃，烘干时间为10-15min；所述二次烘干温度应控制在10-15℃，烘干时间为5-10min。

进一步地，所述搅碎机的转速为8000r/min，其搅碎时间为30-60min;所述露水草粉末为3-5μm。

进一步地，所述高效液相色谱仪包括溶剂输送系统、进样系统、分离系统（色谱柱）、检测系统和记录系统。