[发明专利]一种对外界环境中可利用磷酸盐浓度变化发生感应的分子元件及其突变分子元件和应用

权利要求书

1.一种对外界环境中可利用磷酸盐浓度变化发生感应的分子元件，其特征在于，所述分子元件的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.权利要求1所述分子元件在检测外界环境中可利用磷酸盐浓度中的应用。

3.一种用于有机膦降解的转基因微生物在检测外界环境中可利用磷酸盐浓度中的应用，其特征在于，所述转基因微生物包含权利要求1所述分子元件。

4.一种利用权利要求1所述分子元件检测外界环境中可利用磷酸盐浓度的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）将权利要求1所述分子元件与GFP荧光报告基因相连并分子克隆到载体中，得到重组载体；

2）将所述重组载体以三亲结合方法转入集胞藻中，得到重组集胞藻；

3）将所述重组集胞藻置于标准BG11培养基中培养36~40h后置于外部环境中，检测荧光信号。

5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，当所述外部环境中磷酸盐浓度≥115 µM时所述分子元件被抑制，GFP绿色荧光蛋白不表达；在磷酸盐浓度≤23 µM时所述分子元件被彻底激活，完全表达GFP绿色荧光蛋白；在磷酸盐浓度为57.5 µM时，所述分子元件处于半开状态，表达GFP绿色荧光蛋白。

6.一种对外界环境中可利用磷酸盐浓度变化发生感应的突变分子元件，其特征在于，所述突变分子元件的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。

7.权利要求6所述突变分子元件在精细指示环境中可利用磷酸盐浓度或构建指示环境中可利用磷酸盐浓度的重组细胞中的应用。

8.根据权利要求7所述应用，其特征在于，与权利要求1所述分子元件相比，所述突变分子元件对外部磷酸盐浓度的变化会产生更为明显的下游报告基因的荧光强度及敏感性。

9.一种用于指示环境中可利用磷酸盐浓度的检测试剂盒，其特征在于，包括含权利要求1所述分子元件或权利要求6所述突变分子元件的重组细胞。