[发明专利]一种CSFV的IFA抗体检测方法

权利要求书

1.一种CSFV的IFA抗体检测方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)将PK15细胞按照1.0×10⁵接种到96孔细胞培养板，待细胞贴壁后，将CSFV病毒液用含2％胎牛血清的DMEM以1:10稀释，然后加入到96孔细胞培养板中，每孔100μL；放入37℃5％CO₂培养箱培养48h，每天观察细胞生长情况；

(2)2天后，弃去96孔细胞培养板中培养基，用PBST温和清洗细胞，拍干；

(3)加入预冷的无水乙醇，每孔50μL，-20℃放置30min后取出，弃去无水乙醇，PBST清洗，拍干；

(4)加入5％的脱脂奶粉进行封闭，每孔200μL，37℃温箱放置2h；PBST清洗，拍干；

(5)加入CSFV阳性抗体，用PBS按照1:400稀释，每孔加入50μL，37℃温箱放置1h；PBST清洗，拍干；

(6)加入羊抗猪IgG-FITC，用PBS按照1:100稀释，每孔加入50μL，37℃温箱放置1h，PBST清洗，最后每孔加入PBST 50μL，在倒置荧光显微镜进行观察。

2.根据权利要求1所述的一种CSFV的IFA抗体检测方法，其特征在于，所述CSFV病毒液的制备方法如下：将临床采集的病料组织进行研磨，按照1mg组织样品加入1mL PBS溶解，反复冻融3次，取上清；12000rpm离心5min，用0.22μm滤器过滤，获得CSFV病毒液。