[发明专利]任意泳道的western blot孵育与检测的装置

说明书

本发明公开了任意泳道的western blot孵育与检测的装置，包括泳道位置检测模块、转移膜进样模块、微流体压合模块、条带化学发光与荧光检测模块、抗体进样模块、发光液喷洒模块、环境制冷模块。各模块之前相互协作，共同完成任意泳道、孵育、清洗、发光等功能，提高了蛋白检测的效率和精度。

技术领域

本发明涉及蛋白检测装置，特别涉及任意泳道的western blot孵育与检测的装置。

背景技术

Western Blot技术即蛋白印迹技术是分析生物化学、分子生物学和免疫遗传学的基础的、常用的实验方法，在蛋白质检测、分析和研究领域具有重要意义。其实验原理是通过抗体与附着、固定在化学合成膜的支持物上的靶蛋白发生特异性亲和反应、免疫反应和结合反应以显色分析，从而进行蛋白质定性和定量测量。

1.1 Western Blot的重要性

Renart和George于40年前在PNAS(Proceedings of the National Academy ofSciences of the United States of America)上首次发表了关于Western Blot技术的文章。最开始的印迹技术是Edwin Southern的DNA印迹技术，被称为“Southern Blot”，后George小组发明了名为“Northern Blot”的针对RNA的印迹技术，紧接着Burnette和Towbin在相互不知情的情况下研究并发表了相似的实验对象是蛋白质的印迹技术。由于Burnette和 Stark的实验室都位于美国西海岸，借鉴以前的命名规律，Burnette将应用于蛋白质的印迹技术命名为“Western Blot”。

Western Blot技术与其他技术相比，主要有以下几个特点：

(1)被转移的蛋白质在固相支持物上比在凝胶中更容易与抗体探针接触；

(2)被转移的蛋白质不会因为扩散而降低分辨率；

(3)可以利用被转移的蛋白质进行多种分析；

(4)实验过程需要的试剂较少，处理时间相对较短，固相支持物(化学合成膜)易操作和保存。

由此可见，Western Blot技术与其他技术相比，更宜于进行应用与研究，其发展成为一种重要的检测和诊断方法也是合乎情理的。在临床试验时，Western Blot技术是传染病和自身免疫性疾病、过敏及其他领域的一种可靠的确诊的临床检测手段，1986年该技术已经被应用于检测人脑组织中的标志蛋白，诊断Creutzfeldt-Jakob病(一种常见的由可传播朊蛋白导致的致命性中枢神经疾病)。在蛋白质研究领域，这项技术诞生40年来，不但没有过时，而且一直被实验研究人员密切关注，通过PubMed数据估算与蛋白质相关的文章中Western Blot技术的引用次数，并将其与显微镜检查等其他技术进行比较，可以看出，Western Blot技术不仅被广泛使用，甚至它的使用频率远高于其他技术 (图1)，并且近30年来一直达到8％左右的高稳定比例。无疑，Western Blot技术一直是探索性研究的理想方法，也依然是蛋白检测分析的标准，其重要性不言而喻。

1.2 Western Blot全自动分析仪与传统方法的对比

Western Blot实验主要包括以下几个步骤：

(1)SDS-PAGE电泳：凝胶电泳分离蛋白质；

(2)转印封闭：将蛋白质从胶上转移到固相支持物(常用聚偏二氟乙烯(PVDF)或硝酸纤维素薄膜)上；

(3)免疫反应：第一抗体与靶蛋白特异性结合后，第二抗体与第一抗体特异性结合作为指示物；

(4)显色反应：加入显色液，产生可见的、不溶解的显色反应；