[发明专利]一种快速发酵生产ε-聚赖氨酸及其盐酸盐的方法有效
申请号: | 202011465536.2 | 申请日: | 2020-12-14 |
公开(公告)号: | CN112410381B | 公开(公告)日: | 2022-09-30 |
发明(设计)人: | 赵维武;王宗方;董会;张占成;张旭康;牛兵;吕名豫;张攀先;贾舒武;赵淑君 | 申请(专利权)人: | 郑州拜纳佛生物工程股份有限公司 |
主分类号: | C12P13/02 | 分类号: | C12P13/02;C12N1/20;C08G69/46;C08G69/10;C12R1/47 |
代理公司: | 郑州先风知识产权代理有限公司 41127 | 代理人: | 张鹏辉 |
地址: | 452370 河南省郑*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 发酵 生产 赖氨酸 及其 盐酸 方法 | ||
1.一种快速发酵生产ε-聚赖氨酸及其盐酸盐的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)种子培养:将种子罐用水清洗干净后,开始进行空消,之后将溶氧和pH电极校正准确后装入种子罐内,配制种子培养基至种子罐,再进行实消,降温至30℃,并将实消后降温至30℃的糖并至种子罐中,调节好种子培养所需控制的参数将实验室培养好的斜面白色链霉菌菌种接种至种子罐中,培养14-22h,得发酵用菌种;
(2)发酵培养:将发酵罐用水清洗干净后,开始进行空消,之后将溶氧和pH电极校正准确后装入发酵罐内,配制发酵培养基至发酵罐,之后进行实消,降温至30℃,并将实消后降温至30℃的糖并至发酵罐中,调节好发酵培养所需的参数,将步骤(1)制备的发酵用菌种移种至发酵罐中,使得菌体浓度达到15%以上,发酵15-22h,之后用氨水自动调整发酵液的pH为4.1±0.2,以无菌操作的方式一定速度连续流加葡萄糖,在发酵进行到第30-35h开始流加氯化钙,间隔5-30min再流加与氯化钙等摩尔等量的硫酸铵,葡萄糖的残留量控制在0.2%-2%,发酵120-136h,即制得发酵液;
(3)发酵结束后,(a):将步骤(2)制备的发酵液依次进行过滤、碱化、吸附、氨水解析、脱色、纳滤、干燥,即得ε-聚赖氨酸;或(b):将步骤(2)制备的发酵液依次进行过滤、碱化、吸附、盐酸解析、脱色、纳滤、干燥,即得ε-聚赖氨酸盐酸盐。
2.根据权利要求1所述的一种快速发酵生产ε-聚赖氨酸及其盐酸盐的方法,其特征在于,所述步骤(1)中种子培养所需控制的参数为温度自动控制在30±1℃,溶氧大于30%,罐压在0.01-0.03MPa,pH调至6.8-7.0,之后用氨水将pH自动控制在6.0。
3.根据权利要求1所述的一种快速发酵生产ε-聚赖氨酸及其盐酸盐的方法,其特征在于,所述步骤(2)中发酵培养基组成为:25-50g/L 葡萄糖、5g/L 酵母粉、5-15g/L(NH4)SO4 、0.8g/ L K2HPO4•3H2O、1.36g/L KH2PO4、0.5g/L MgSO4•7H2O、0.04g/L ZnSO4•7H2O、0.03g/LFeSO4•7H2O、所述发酵培养基的pH为6.0-6.2。
4.根据权利要求1所述的一种快速发酵生产ε-聚赖氨酸及其盐酸盐的方法,其特征在于,所述步骤(2)中发酵培养所需控制的参数为温度自动控制在30±1℃,溶氧大于30%,罐压在0.01-0.03MPa,pH调至6.0-6.2用氨水进行自动控制。
5.根据权利要求1所述的一种快速发酵生产ε-聚赖氨酸及其盐酸盐的方法,其特征在于,所述步骤(3)中(a)的具体操作方法为:向步骤(2)所得的发酵液中加入珍珠岩进行板框过滤,得过滤清液,将过滤清液pH调至碱性后经D155树脂上柱吸附,吸附至饱和后依次用反渗透水洗涤和氨水洗脱,制得ε-聚赖氨酸溶液,然后将ε-聚赖氨酸溶液升温至60±5℃,加入活性炭进行脱色,再进行板框过滤,得ε-聚赖氨酸清液,将ε-聚赖氨酸清液加入纳滤罐进行循环纳滤,直至纳滤浓缩液的浓度大于10g/L,滤出盐水的电导率小于200 us/cm停止纳滤,最后将纳滤浓缩液进行喷雾干燥,得到白色或黄色粉末状产品,即为ε-聚赖氨酸。
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