[发明专利]细胞分离装置、系统和方法

权利要求书

1.一种细胞分离系统，其包含：

(a)套筒，其包含

(i)包含至少一个输入口、第一出口和第二出口的处理容器；

(ii)包含输入口的第二容器；

(iii)包含输入口和第一出口的第三容器；

(iv)连接所述处理容器的第一出口和所述第二容器的输入口的第一导管，其中所述第一导管包含第一可逆关闭装置，其中所述第二容器与所述处理容器瞬时流体连接，使得当所述第一可逆关闭装置打开时，只可发生从所述处理容器向所述第二容器的流体流动；

(v)连接所述处理容器的第二出口和所述第三容器的输入口的第二导管，其中所述第二导管包含第二可逆关闭装置，其中所述第三容器与所述处理容器瞬时流体连接，使得当所述第二可逆关闭装置打开时，只可发生从所述处理容器向所述第三容器的流体流动；

(b)包含至少一个端口的转移容器；

(c)至少第三导管，其连接：

(i)所述第三容器的第一出口与所述转移容器的所述至少一个端口，和

(ii)所述转移容器的所述至少一个端口与所述处理容器的所述至少一个输入口，

其中所述至少第三导管包含至少第三可逆关闭装置，使得(A)所述第三容器与所述转移容器瞬时流体连接，和(B)所述转移容器与所述处理容器瞬时流体连接，其中所述至少第三导管配置成使得下列中仅一项可以成立：

(I)当所述至少第三可逆关闭装置打开时，只可发生从所述第三容器向所述转移容器的流体流动；或

(II)当所述至少第三可逆关闭装置打开时，只可发生从所述转移容器向所述处理容器的流体流动；以及

(d)控制模块，其配置成控制在至少所述套筒、以及所述第一导管和第二导管中的活动。

2.一种细胞分离方法，其包含：

(a)在功能封闭系统中处理体积为至少10mL(或者，可选地，至少25mL，至少50mL，至少75mL，至少100mL，至少200mL)的主液，其中所述主液包含(i)靶细胞，和(ii)浮力试剂，其中所述处理包含使所述靶细胞和所述浮力试剂在适于促进所述细胞附着于一种或多种所述浮力试剂的条件下接触一定时间以生成附着的靶细胞；

(b)向所述功能封闭系统内的所述主液施加矢量力例如离心，以引起所述附着的靶细胞在所述主液内分层；以及

(c)将所述附着的靶细胞隔离到所述功能封闭系统内的区域。

3.根据权利要求2所述的细胞分离方法，其中所述浮力试剂包含制造的浮力试剂，其中各种制造的浮力试剂包含如下所述的浮力试剂：其中浮力标签和结合剂在与所述主液中的靶细胞接触之前彼此附着以形成所述制造的浮力试剂。

4.根据权利要求2所述的细胞分离方法，其中所述浮力试剂包含在所述主液内组装的二级浮力试剂，其中方法还包含在步骤(a)之前的预处理步骤，其中所述预处理步骤包含使所述主液与浮力标签和结合剂在适于促进所述结合剂与所述浮力标签附着的条件下接触一定时间以产生所述浮力试剂。

5.根据权利要求4所述的方法，其中

(i)各结合剂包含(A)包含能够与所述靶细胞上的至少一个细胞表位结合的作用剂的初级结合剂，(B)与所述初级结合剂结合的第一连接子，其中所述第一连接子包含具有第一互补区的第一寡核苷酸；

(ii)各浮力标签包含与所述浮力标签结合的第二连接子；

其中所述第二连接子包含具有第二互补区的第二寡核苷酸，其中所述第二互补区与所述第一互补区完全互补，并且其中所述第一和第二互补区的杂交体具有至少40℃的计算Tm；

其中所述预处理步骤包含使所述主液与所述浮力标签和所述结合剂在适于促进所述第一和第二互补区杂交的条件下接触一定时间以产生所述浮力试剂；

其中所述处理包含使所述靶细胞和所述浮力试剂在适于生成所述附着的靶细胞的条件下在所述主液中接触；并且其中所述方法还包含

(d)在步骤(c)之后，在所述功能封闭系统内使所述附着的靶细胞经受37℃或更低的温度达足以使所述第一互补区和所述第二互补区去杂交的一定时间以从所述靶细胞释放所述浮力试剂。