[发明专利]一株深海芽孢杆菌在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用

说明书

本发明提供了一株深海芽孢杆菌在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用，深海芽孢杆菌Bacillus sp.G213‑b的保藏号为CCTCC NO：M 2019805，芽孢杆菌形成的微生物被膜在诱导厚壳贻贝稚贝附着中应用；诱导的过程为：将深海芽孢杆菌分离、纯化得到纯种芽孢杆菌株；将纯种芽孢杆菌株接种培养、沉淀、洗涤得到悬浮菌液；向培养皿中加入悬浮菌液和灭菌海水培养，得到微生物被膜，将附有微生物被膜的载玻片和厚壳贻贝稚贝诱导培养；本发明的不同细菌初始密度微生物被膜对稚贝的诱导活性有所不同，深海芽孢杆菌在提高厚壳贻贝人工育苗技术、改善厚壳贻贝养殖产业问题和海洋牧场建设等生态修复方面的应用提供坚实的理论基础。

技术领域

本发明属于海洋微生物技术领域，涉及一株深海芽孢杆菌在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用，具体涉及一株深海细菌芽孢杆菌(Bacillus sp.G213-b)的分离、纯化、鉴定和保藏，以及其在不同初始细菌密度条件下形成的微生物被膜对厚壳贻贝稚贝附着的影响作用。

背景技术

厚壳贻贝(Mytilus coruscus)，隶属于软体动物门(Mollusca)，双壳纲(Bivalvia)，贻贝目(Mytilodia)，贻贝科(Mytilidae)，是我国重要的海产贝类养殖品种，分布于黄海、渤海和东海沿岸。厚壳贻贝营养价值较高，具有开阔的养殖前景和市场开发潜力。在厚壳贻贝生活史中，浮游生活阶段的后期，眼点幼虫会附着变态成为稚贝，并最终发育为成贝。在稚贝生长为成贝的过程中，当环境发生变化，厚壳贻贝稚贝能够自行切断足丝，开始爬行并重新选择适宜的附着基进行再次附着。厚壳贻贝作为一种重要的海水贝类养殖品种，其苗种主要依靠天然苗种和半人工采苗获得。近年来，渔业资源的过度开发，天然苗种无法满足厚壳贻贝养殖产业的发展。因此，解决苗种问题、探索利用细菌形成微生物被膜诱导厚壳贻贝附着等生物工程技术显得尤为必要。

发明内容

针对现有技术中的不足，本发明的首要目的是提供一株深海芽孢杆菌在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用。

本发明的第二个目的是提供上述深海芽孢杆菌形成的微生物被膜在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用。

为达到上述首要目的，本发明的解决方案是：

一株深海芽孢杆菌在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用。

一株深海芽孢杆菌，其保藏号为CCTCC NO：M 2019805，该深海芽孢杆菌为：Bacillus sp.G213-b。

该深海芽孢杆菌的16S rRNA基因序列为：SEQ ID NO.1。

为达到上述第二个目的，本发明的解决方案是：

一株深海芽孢杆菌形成的微生物被膜在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用。

优选地，诱导的过程为：将深海芽孢杆菌分离、纯化得到纯种芽孢杆菌株；将纯种芽孢杆菌株接种培养、沉淀、洗涤得到悬浮菌液；向培养皿中加入悬浮菌液和灭菌海水培养，得到微生物被膜，将附有微生物被膜的载玻片和厚壳贻贝稚贝诱导培养。

优选地，悬浮菌液的初始密度为1.0×10⁶-5×10⁸cells/mL。

进一步优选地，悬浮菌液的初始密度选自1.0×10⁶cells/mL、1.0×10⁷cells/mL、1.0×10⁸cells/mL和5×10⁸cells/mL中的一种以上。

由于采用上述方案，本发明的有益效果是：

本发明的深海芽孢杆菌形成的微生物被膜具有诱导厚壳贻贝稚贝附着的活性，且不同细菌初始密度微生物被膜对稚贝的诱导活性也有所不同，故本发明对厚壳贻贝的人工养殖具有重要意义。同时也为深海芽孢杆菌在提高厚壳贻贝人工育苗技术、改善厚壳贻贝养殖产业问题和海洋牧场建设等生态修复方面的应用提供了坚实的理论基础。