[发明专利]一种枸杞子药材中多种有效成分同时快速定性与定量检测方法

权利要求书

1.一种枸杞子药材中多种有效成分同时快速定性与定量检测方法，其特征在于，以枸杞子药材中不存在的成分β-阿林胡萝卜醛1种参照物，采用液相色谱法可同时对枸杞子中叶黄素、玉米黄质、β-胡萝卜素、玉米黄质双棕榈酸酯4种有效成分进行定性和定量计算；其中，叶黄素与β-阿林胡萝卜醛的相对保留时间和相对校正因子分别为0.59-0.65，38.33-42.37；玉米黄质与β-阿林胡萝卜醛的相对保留时间和相对校正因子分别为0.66-0.72，1.12-1.24；β-胡萝卜素与β-阿林胡萝卜醛的相对保留时间和相对校正因子分别为1.62-1.79，4.13-4.57；玉米黄质双棕榈酸酯与β-阿林胡萝卜醛的相对保留时间和相对校正因子分别为4.44-4.90，2.47-2.73；

所述检测方法具体包括如下步骤：

S1配制对照品溶液

称取对照品，并分别向对照品中加入溶剂制成对照品溶液；其中，所述对照品为β-阿林胡萝卜醛、叶黄素、玉米黄质、β-胡萝卜素和玉米黄质双棕榈酸酯；

S2配制样品溶液

取待测样品加入适宜溶剂，同时加入β-阿林胡萝卜醛对照品溶液，制备得到样品溶液；

S3液相色谱检测

分别将对照品溶液和样品溶液进行液相色谱检测，并将β-阿林胡萝卜醛作为参照物，分别得到包括参照物对照品在内的各对照品的保留时间和峰面积，同时读取样品溶液检测结果中各待测成分色谱峰的保留时间和峰面积以及参照物色谱峰的保留时间和峰面积；

S4测定各对照品相对保留时间和相对校正因子

将β-阿林胡萝卜醛作为参照物，分别计算各对照品色谱峰保留时间与参照物色谱峰保留时间的比值得到对照品的相对保留时间，以及分别计算各对照品的浓度和峰面积比值得到各对照品的校正因子，再计算各对照品的校正因子与参照物的校正因子的比值得到各对照品的相对校正因子；

S5成分色谱峰的归属和含量的计算

由相对保留时间确定样品溶液检测色谱峰中各待测成分的归属；由相对校正因子、各待测成分色谱峰峰面积、参照物的浓度和参照物色谱峰的峰面积分别计算样品中叶黄素、玉米黄质、β-胡萝卜素和玉米黄质双棕榈酸酯的含量；

S6计算本法与外标法测定结果的相对偏差

由本法通过相对校正因子计算出的各待测成分的含量与外标法测定的各待测成分的含量进行比较，计算本法与外标法测定结果的相对偏差，以确定本法结果的准确性；

所述步骤S3中，液相色谱检测的色谱条件是：填料为C30的色谱柱，色谱柱内径为4.6mm，且长度为250mm，填料粒径为5μm，洗脱条件为洗脱液A-洗脱液B，梯度洗脱：0～20min洗脱液A为70％～50％，洗脱液B为30％～50％；20～48min洗脱液A为50％，洗脱液B为50％；48～50min洗脱液A为50％～70％，洗脱液B为50％～30％；50～55min洗脱液A为70％，洗脱液B为30％；流速为1mL/min；进样量：20μl；柱温：20℃；检测波长450nm；所述洗脱液A为体积比为81:14:5的甲醇：乙腈：水溶液，所述洗脱液B为二氯甲烷。

2.根据权利要求1所述的一种枸杞子药材中多种有效成分同时快速定性与定量检测方法，其特征在于，叶黄素与β-阿林胡萝卜醛的相对保留时间和相对校正因子分别为0.62，40.35；玉米黄质与β-阿林胡萝卜醛的相对保留时间和相对校正因子分别为0.69，1.18；β-胡萝卜素与β-阿林胡萝卜醛的相对保留时间和相对校正因子分别为1.70，4.35；玉米黄质双棕榈酸酯与β-阿林胡萝卜醛的相对保留时间和相对校正因子分别为4.67，2.60。

3.根据权利要求1所述的一种枸杞子药材中多种有效成分同时快速定性与定量检测方法，其特征在于，所述步骤S1和所述步骤S2中的溶剂相同，且所述溶剂至少为甲醇、乙醇、水中的一种。

4.根据权利要求1或3所述的一种枸杞子药材中多种有效成分同时快速定性与定量检测方法，其特征在于，所述步骤S1中，加入溶剂分别制成浓度为0.1-1mg/mL的对照品溶液。

5.根据权利要求1或3所述的一种枸杞子药材中多种有效成分同时快速定性与定量检测方法，其特征在于，所述步骤S2具体为：取待测样品精密称量，加入10-50倍量的溶剂经过回流、超声或冷浸处理，过滤后得到样品溶液。